食醋中乙偶姻转化及巴氏醋杆菌乙偶姻还原酶研究

目录

声明

第一章 绪论

1.1 醋

1.1.1 食醋的种类

1.1.2 原料

1.1.3 微生物菌群

1.1.4 发酵工艺

1.2 乙偶姻

1.2.1 性质及用途

1.2.2 乙偶姻的合成与代谢

1.2.3 同位素示踪法

1.3 2,3,5,6-四甲基吡嗪

1.3.1 2,3,5,6-四甲基吡嗪性质及用途

1.3.2 食醋中TMP 的含量测定

1.3.3 TMP 的形成机理

1.4 本论文的研究背景与意义

1.5 本论文的主要研究内容

第二章 测定食醋中乙偶姻与四甲基吡嗪含量的气相色谱法

2.1 实验材料

2.1.1 主要试剂及醋样

2.1.2 实验仪器

2.2 试验方法

2.2.1 溶剂萃取及气相色谱检测

2.2.2 方法的有效性

2.2.3 定量分析方法的比较

2.3 结果与讨论

2.3.1 调节醋样pH

2.3.2 气相色谱法与溶剂萃取法的对比选择

2.3.3 气相色谱柱的选择

2.3.4 方法的有效性

2.3.5 定量分析方法的比较

2.4 小结

第三章 TMP三维模型的建立

3.1 实验材料

3.1.1 实验试剂

3.1.2 实验仪器

3.2 实验方法

3.2.1 铵离子含量测定

3.2.2 统计处理数据

3.2.3 液态发酵醋中TMP 的检测

3.3 实验结果

3.3.1 137种醋样分类

3.3.2 三维模型的建立

3.3.3 液态发酵醋中TMP 的检测

3.4 小结

第四章 同位素示踪法验证醋中四甲基吡嗪的前体

4.1 实验材料

4.1.1 主要试剂

4.1.2 实验仪器

4.1.3 培养基配制

4.2 试验方法

4.2.1 菌种的筛选与分离纯化

4.2.2 菌种的活化

4.2.3 制备液体种子

4.2.4 发酵生产 13C 标记的乙偶姻

4.2.5 提取 13C 标记的乙偶姻

4.2.6 同位素示踪法

4.3 实验结果

4.3.1 菌种的筛选与鉴定

4.3.2 13C 标记同位素乙偶姻的发酵制备

4.3.3 同位素示踪法验证TMP 的前体

4.4 小结

第五章 乙偶姻还原酶的克隆表达与酶学性质的研究

5.1 实验材料

5.1.1 菌株、质粒

5.1.2 引物

5.1.3 实验仪器及试剂

5.1.4 常用溶液的配制

5.2 实验方法

5.2.1 载体的构建

5.2.2 3号酶蛋白表达与纯化

5.2.3 酶活的测定

5.2.4 酶学性质的测定

5.3 实验结果

5.3.1 乙偶姻还原酶的克隆

5.3.2 乙偶姻还原酶的表达纯化

5.3.3 3号酶酶活的测定

5.3.4 3号酶酶活学性质的测定

5.4 小结

结 论

参考文献

附录1 Ⅰ组，山西老陈醋（SAV）

附录2 Ⅱ组，非山西固态醋（non-SAV）

附录3 Ⅲ组，液态发酵醋

附录4 芽孢杆菌H-18W 16S rDNA 序列

攻读硕士学位期间取得的学术成果

致 谢