与褪黑激素作用相关的LncRNA MTC对辽宁绒山羊绒生长相关基因表达的影响

目录

声明

1.绪论

1.1毛囊（hair follicle，HF）

1.1.1 辽宁绒山羊及毛囊

1.1.2 毛囊发育的影响因素

1.1.3 毛囊的再生

1.2长链非编码RNA（Long noncoding RNA，LncRNA）

1.2.1 LncRNA在羊毛生长方面的筛选鉴定

1.2.2 LncRNA在毛发生长方面的功能研究

1.3 褪黑激素（Melatonin，MT）

1.3.1 褪黑激素在皮肤中的研究

1.3.2 褪黑激素在羊毛生长方面的功能研究

1.4 毛囊发育及绒毛生长相关基因

1.5 前期研究结果及研究意义

2.1实验材料

2.2实验仪器及试剂

2.3实验方法

2.3.1构建LncRNA MTC过表达慢病毒载体

2.3.2 LncRNA基因RNAi靶点设计、合成及干扰载体的构建

2.3.3 LncRNA MTC基因干扰慢病毒小量包装及干扰效果验证

2.3.4 病毒液目的基因表达量检测

2.3.5 qPCR检测绒毛生长相关基因表达量

2.3.6 辽宁绒山羊皮肤细胞培养

2.3.7 CCK-8法检测LncRNA MTC对皮肤细胞增殖的影响

2.3.8 统计学分析

3 实验结果

3.1 LncRNA MTC上调对羊皮肤细胞中绒生长相关基因表达量的影响

3.1.1 LncRNA MTC过表达慢病毒载体的构建

3.1.2 qPCR检测转染效率及目的质粒的表达情况

3.1.3 LncRNA MTC上调对绒生长相关基因表达情况的影响

3.2 LncRNA MTC下调和MT处理对羊皮肤细胞中绒生长相关基因表达量的影响

3.2.1 LncRNA MTC基因干扰慢病毒包装及转染效率检测

3.2.2 qPCR检测 LncRNA MTC干扰慢病毒转染效率及干扰效果

3.2.3 LncRNA MTC敲低和MT处理对绒毛生长相关基因表达量的影响

3.讨论

3.1 LncRNA MTC促进皮肤细胞的增殖

3.2 LncRNA MTC与绒毛生长相关基因的研究

结论

论文创新点

参考文献

附录A qPCR ct值表格

附录B LncRNA MTC过表达病毒液qPCR检测的扩增曲线及溶解曲线

附录C LncRNA MTC过表达后绒生长相关基因qPCR检测的扩增曲线及溶解曲线

附录D LncRNA MTC干扰病毒液qPCR检测的扩增曲线及溶解曲线

附录E LncRNA MTC敲减后绒生长相关基因qPCR检测的扩增曲线及溶解曲线

附录F 载体图谱

攻读硕士学位期间发表学术论文情况

致谢