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组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶LSD1在巨噬细胞免疫特性转换中的调控作用及相关机制研究

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第一章 前言

1.1 巨噬细胞来源功能及其可塑性

1.1.1 巨噬细胞来源及异质性

1.1.2 巨噬细胞功能

1.1.3 巨噬细胞可塑性

1.2 表观遗传与巨噬细胞

1.2.1 表观遗传影响基因的表达

1.2.2 表观遗传调控巨噬细胞表型及功能转换

1.2.3 表观遗传酶 LSD1 与免疫

1.3 本文的主要研究目的和意义

参考文献

第二章 实验材料与方法

2.1 常见溶液的配制

2.2 细胞培养

2.2.1 悬浮细胞THP1 培养

2.2.2 贴壁细胞培养

2.2.3 细胞冻存

2.2.4 细胞复苏

2.3 细胞计数

2.4巨噬细胞及其极化状态模型的构建

2.5 细胞转染及稳转株筛选

2.6 Real-Time PCR及荧光定量PCR

2.6.1 RNA 提取

2.6.2 RNA 反转录

2.6.3 荧光定量 PCR

2.7 巨噬细胞表型鉴别

2.8 巨噬细胞吞噬功能检测

2.9 酶联免疫吸附实验

2.10 细胞全蛋白提取

2.11 酸沉淀法提取细胞组蛋白

2.12 BCA 蛋白定量

2.13 Western Blotting 实验

2.14 细胞活性检测

2.15 肿瘤相关巨噬细胞模型构建

2.16 T 细胞增殖实验

2.17 共培养增殖实验

2.18 Transwell 实验

2.19 结果分析

第三章 实验结果与讨论

3.1 LSD1 参与巨噬细胞分化和极化

3.1.1巨噬细胞模型构建与验证

3.1.2 经典活化的M1 型巨噬细胞模型构建与验证

3.1.3替代活化的M2型巨噬细胞模型构建与验证

3.1.4 LSD1 在不同极化状态下的巨噬细胞中显著高表达

3.2 LSD1 对M0 型巨噬细胞免疫特性转换的调控作用

3.2.1 抑制LSD1 酶活性对M0 型巨噬细胞免疫特性的影响

3.2.2 干扰LSD1 表达对M0型巨噬细胞免疫特性转换的影响

3.3 抑制LSD1可增强肿瘤微环境中巨噬细胞的免疫监察功能

3.3.1 抑制LSD1 可增强M1型巨噬细胞功能

3.3.2 抑制LSD1 可促M2型巨噬细胞向经典活化方向极化

3.3.3 抑制LSD1 后肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)促肿瘤功能的变化

3.4 LSD1 调控巨噬细胞免疫特性转换的机制探索

3.4.1 IFNγ-STAT1 通路

3.4.2 TLR4-IRF3-IFNβ 通路

3.4.3 TLR4-NFκB 通路

3.5 讨论

结论

参考文献

个人简历

致谢

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著录项

  • 作者

    孙沛;

  • 作者单位

    郑州大学;

  • 授予单位 郑州大学;
  • 学科 药学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 杜娟;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R73TS2;
  • 关键词

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