酒精性股骨头坏死凋亡相关蛋白的表达及miRNA-5703对酒精诱导hFOB1.19细胞凋亡的影响

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中英文缩略词表

引言

第一部分 酒精性股骨头坏死患者与股骨颈骨折患者凋亡相关蛋白的表达差异

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学方法

结果

1 大体观表现

2 HE染色镜下观表现

3 TUNEL实验检测股骨头坏死与正常股骨头细胞凋亡情况

4 免疫组织化学染色

讨论

结论

参考文献

第二部分 酒精诱导hFOB1.19成骨细胞凋亡相关蛋白的表达及差异表达miRNA的筛选

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学方法

结果

1 CCK-8检测成骨细胞半数凋亡的酒精浓度

2 酒精处理后细胞的形态学改变

3 Western检测

4 总RNA提取质检结果

5 RNA芯片杂交

6 高通量测序检测差异表达的miRNA

7 聚类分析差异表达的miRNA

8 共有靶基因的预测

9 靶基因的GO富集和KEGG信号通路分析

讨论

结论

参考文献

第三部分 miR-5703对酒精诱导hFOB1.19成骨细胞凋亡的影响及作用机制

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学方法

结果

1 双荧光素酶报告基因载体的构建及鉴定

2 miR-5703表达载体的构建及鉴定

3 双荧光素酶报告基因验证miR-5703和 Caspase-3的靶向关系

4 病毒包装及GTP-miR-5703滴度测定

5 慢病毒转染hFOB1.1 9成骨细胞

6 嘌呤霉素筛选

7 qPCR检测miR-5703表达情况

8 TUNEL检测细胞凋亡情况

9 CCK-8检测不同处理下细胞增殖抑制率

10 Western blot 检测酒精诱导的 hFOB1.19 成骨细胞中 Full length-Caspase-3的表达

11 Western blot检测hFOB1.19成骨细胞中Cleaved-Caspase-3的表达量

讨论

结论

参考文献

全文结论

综述:酒精性股骨头坏死发病机制的研究进展

参考文献

个人简历

致谢