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麻疯树JcGAST1基因的克隆及其在麻疯树花发育过程中的表达分析

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目录

缩略词

引言

第一章 文献综述

1.1麻疯树生物学特性

1.2麻疯树的相关研究

1.2.1麻疯树在应用方面的研究

1.2.2麻疯树花形态解剖学研究

1.2.3麻疯树在分子生物学的研究

1.2.4植物激素对麻疯树花的作用

1.3赤霉素的研究进展

1.3.1赤霉素在植物生长发育中的作用

1.3.2赤霉素在花发育中的作用

1.3.3赤霉素信号转导途径

1.4 GAST基因家族

1.4.1 GAST基因家族简介

1.4.2 GAST蛋白家族的研究

第二章 麻疯树JcGAST1基因全长克隆和分析

2.1实验材料

2.1.1所用材料

2.1.2实验试剂和耗材

2.1.3实验所用的仪器设备

2.1.4实验所用引物

2.2实验方法

2.2.1麻疯树花总RNA的提取和检测

2.2.2 JcGAST1基因cDNA全长克隆

2.2.3 JcGAST1基因ORF扩增

2.2.4 JcGAST1序列分析及其理化性质分析

2.3结果与分析

2.3.1麻疯树花总RNA的检测

2.3.2 RACE-PCR结果分析

2.3.3 JcGAST1基因的cDNA全长序列

2.3.4 JcGAST1基因的ORF序列

2.3.5 JcGAST1生物学信息结果的分析

2.4讨论

第三章 麻疯树JcGAST1基因的原核表达分析

3.1实验材料

3.1.1所用材料

3.1.2实验试剂和耗材

3.1.3实验所用的仪器设备

3.1.4实验所用引物

3.2实验方法

3.2.1质粒的提取

3.2.2原核表达载体构建

3.2.3 JcGAST1蛋白的诱导表达

3.2.4 JcGAST1蛋白的SDS-PAGE电泳检测

3.2.5 JcGAST1蛋白质谱鉴定

3.2.6 JcGAST1蛋白结构分析

3.3结果与分析

3.3.1 JcGAST1 ORF质粒的检测

3.3.2原核表达载体酶切结果

3.3.3 JcGAST1蛋白的SDS-PAGE电泳检测分析

3.3.4 JcGAST1蛋白质谱鉴定分析

3.3.5 JcGAST1蛋白结构分析结果

3.4讨论

第四章 麻疯树花发育不同时期JcGAST1基因的表达分析

4.1实验材料

4.1.1所用材料

4.1.2实验试剂和耗材

4.1.3实验仪器设备

4.1.4实验所用引物

4.2实验方法

4.2.1麻疯树花的分类

4.2.2不同时期的花总RNA的提取

4.2.3不同时期的麻疯树花cDNA第一链的合成

4.2.4 JcGAST1基因的实时荧光定量分析

4.3结果与分析

4.3.1不同发育时期的麻疯树花的选取

4.3.2总RNA及cDNA的检测

4.3.3 JcGAST1基因的表达分析

4.4讨论

第五章 JcGAST1蛋白在麻疯树花发育过程的表达分析

5.1实验材料

5.1.1所用材料

5.1.2实验试剂和耗材

5.1.3实验仪器设备

5.2实验方法

5.2.1 JcGAST1蛋白的提取和检测

5.2.2 JcGAST1蛋白的抗体制备

5.2.3JcGAST1蛋白的Western Blot

5.3结果与分析

5.3.1 JcGAST1蛋白分离纯化检测

5.3.2 JcGAST1蛋白的抗体检测

5.3.3JcGAST1蛋白的Western Blot结果分析

5.4 讨论

第六章 麻疯树JcGAST1基因的遗传转化分析

6.1实验材料

6.1.1所用材料

6.1.2实验所用试剂和耗材

6.1.3实验所用仪器设备

6.1.4实验所用引物

6.2实验方法

6.2.1植物表达载体的构建

6.2.2过表达载体转化农杆菌

6.2.3烟草的遗传转化

6.2.4转基因烟草的分子检测

6.3结果与分析

6.3.1植物表达载体构建结果

6.3.2转基因烟草的获取

6.3.3转基因烟草的分子检测结果

6.3.4转基因烟草的形态学分析

6.4讨论

第七章 结论与展望

7.1结论

7.2展望

7.3创新点

附录

附录1 课题资助项目

附录2 硕士研究生期间发表的文章

附录3 硕士研究生期间参与的科研项目

附录4 JcGAST1基因的全长cDNA(5′→3′)

附录5 原核表达重组载体pET-30a/JcGAST1图谱

附录6 植物表达重组载体pBWA(V)HS/JcGAST1图谱

致谢

参考文献

声明

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著录项

  • 作者

    赵亮清;

  • 作者单位

    贵州大学;

  • 授予单位 贵州大学;
  • 学科 林学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 徐刚;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 TS2TQ4;
  • 关键词

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