LC-MS/MS检测鸡可食性组织中黏菌素残留量的方法研究

摘要

黏菌素（coslitin）也称为多黏菌素E（polymyxin E）、抗敌素，它是一种含有至少30多种成分的白色结晶或结晶性粉末状混和物，是主要由黏菌素A（多黏菌素E1， C53H100N16O13）和黏菌素B（多黏菌素E2，C52H98N16O13）组成，此类药物口服不吸收但注射给药吸收迅速。本研究目的是建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测鸡可食性组织（肌肉、肾脏、肝脏、皮脂）中黏菌素残留量的方法，为动物源性食品中黏菌素的残留提供检测技术。　　选用超高效液相色谱-串联质谱仪5500，采用电喷雾离子源正离子检测模式，多反应检测模式，在700℃的离子源温度，5500 V的喷雾电压，55 arbitrary units的鞘气（N2）流速，20 psi的气帘气压力，60 psi的雾化气压力，50 psi的辅助气压力，100 ms滞留时间的质谱条件下，将鸡的可食性组织经过10%的三氯乙酸和50%的乙腈水提取，继而过HLB小柱，最后上机检测。　　实验结果表示，样品浓度范围在10μg/kg～400μg/kg范围内黏菌素A和黏菌素B的峰面积与样品的质量浓度呈现的线性关系差。黏菌素A和黏菌素B在鸡的肌肉、皮脂、肝脏和肾脏中的检测限（LOD）均为5μg/kg，定量限（LOQ）均为10μg/kg。在鸡的肌肉、皮脂、肝脏及肾脏中分别添加LOQ、0.5MRL、MRL、2MRL四个浓度进行添加回收试验。鸡肌肉组织中黏菌素A在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为70.45%～94.57%，批内变异系数3.16%～7.59%，批间变异系数4.96%～7.28%，黏菌素B在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为73.49%～89.81%，批内变异系数3.92%～8.79%，批间变异系数6.43%～9.28%；鸡脂肪组织中黏菌素A在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为70.45%～97.09%，批内变异系数2.56%~9.32%，批间变异系数5.44%～9.41%，黏菌素B在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为76.98%～91.36%，批内变异系数4.20%～8.42%，批间变异系数3.76%～8.31%；鸡肝脏组织中黏菌素A在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为83.92%～94.21%，批内变异系数1.60%～8.30%，批间变异系数3.16%~5.62%，黏菌素B在10、75、150、300μg/kg添加浓度的批内平均回收率为81.63%~91.39%，批内变异系数4.58%～8.43%，批间变异系数3.52%～8.45%。鸡肾脏组织中黏菌素A在10、100、200、400μg/kg添加浓度的批内平均回收率为77.53%～94.68%，批内变异系数3.20%～8.68%，批间变异系数3.69%～8.37%，黏菌素A在10、100、200、400μg/kg添加浓度的批内平均回收率为79.34%～90.47%，批内变异系数3.40%～8.40%，批间变异系数2.86%～5.84%。　　实验结果表明，本研究建立的LC-MS/MS检测鸡可食性组织中黏菌素残留量的方法操作简单、灵敏度高、重复性良好，符合兽药残留分析的要求。

目录

第一个书签之前

1 前言

1.1 黏菌素的研究概况

1.1.1 多黏菌素的概述

图1 多黏菌素B和多黏菌素E的化学结构

1.1.2 黏菌素的理化性质和作用机制

1.1.3 黏菌素的临床应用

1.2 兽药残留分析技术

1.2.1 样品前处理技术

1.2.2 分析检测技术

2.1 材料

2.1.2 主要试剂

2.1.3 仪器和设备

2.1.4 溶液配制

2.2 样品前处理

2.2.3 色谱质谱条件

2.2.7 准确度和精密度

3.1 质谱图

3.2 检测限与定量限

3.3 标准曲线与线性范围

3.4 回收率与变异系数

3.5基质效应

4 讨论

4.1 样品前处理过程的优化

4.1.1 提取液的比较

4.1.2 净化方法的比较

4.1.3 洗脱液的选择

4.2 仪器条件的优化

4.2.2 质谱条件的优化

4.2.3 液相条件的优化

4.2.4 回收率计算方法的选择

4.3 现有文献方法的比较和选择

5 总结

致 谢

参考文献

附录