N-(6-((2-羟丙基) 氨基)-6-氧代己基)苯甲酰胺HDAC抑制剂的设计、合成及活性评价

摘要

组蛋白去乙酰化酶 (HDACs) 是当前热门的抗肿瘤药物靶点，目前已有六种组蛋白去乙酰化酶抑制剂被批准上市，该类 HDAC 抑制剂具有经典的三段式结构，表面识别区（Cap）、锌离子结合基团（ZBG）和链接单元（Linker）。其中异羟肟酸结构作为锌离子结合基团的 HDAC 抑制剂最具有代表性，但是此类化合物在体内稳定性较差，容易被代谢，且对正常细胞毒性较大。基于此，本研究以 SAHA 的结构作为基础，用羟丙胺酰基结构取代异羟肟酸基团作为新的锌离子结合基团，并在Cap端引入各种取代基团，设计并合成了16个N-(6-((2-羟丙基) 氨基)-6-氧代己基) 苯甲酰胺类化合物。并对这些化合物进行了体外细胞活性评价。具体研究内容如下：　　（1）目标化合物细胞增殖抑制活性评价（MTT实验），我们测定了16个化合物对三种肿瘤细胞株（HeLa、HepG-2、A549）和一种正常细胞株（WI-38）的抑制活性，结果发现，此类化合物对HeLa细胞株敏感（IC50=19.93~77.06 μM），且化合物a6（IC50=24.22±0.19μM）、a9（IC50=19.93±0.58 μM）的活性最好；（2） HDAC酶活性评价，结果发现化合物a6，a9对HDAC具有较好的抑制活性，IC50值分别为34.3±3.25μM，22.5±2.84 μM；（3）化合物a6、a9对HDAC相关蛋白表达量的影响，WB 实验结果表明，a6 可以使细胞 Ac-tubulin 表达量增加，a9即可增加Ac-H3表达量，也增加了Ac-tubulin的表达量，提示化合物a6可能是HDAC6的选择性抑制剂；（4）化合物a6，a9阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡的实验，结果表明化合物a6和a9引起HeLa细胞G0/G1期明显阻滞，且诱导HeLa细胞早期凋亡。　　综上所述，本论文的研究发现了一类对宫颈癌细胞具有良好抑制活性的化合物，也丰富了HDAC抑制剂化合物库，且化合物a6、a9有希望成为HDAC抑制剂的潜力化合物，用来治疗宫颈癌，具有深入研究的价值。

目录

声明

第一章 研究背景

1.1肿瘤

1.1.1肿瘤的发生

1.1.2肿瘤与表观遗传

1.2组蛋白去乙酰化酶

1.2.1组蛋白去乙酰化酶的分类

1.2.2组蛋白去乙酰化酶的结构特点

1.2.3组蛋白去乙酰化酶的生物学功能

1.2.4组蛋白去乙酰化酶与肿瘤的关系

1.3组蛋白去乙酰化酶抑制剂

1.3.1已上市的组蛋白去乙酰化酶抑制剂

1.3.2组蛋白去乙酰化酶抑制剂概述

1.4 总结

第二章 实验和总结

2.1目标化合物的设计和合成方法

2.1.1目标化合物的设计思路和编号

2.1.2目标化合物的合成方法

2.2目标化合物的体外细胞活性评价

2.2.1细胞增殖抑制实验

2.2.2酶试验

2.2.3Western Blot实验

2.2.4周期实验

2.2.4凋亡实验

第三章 实验结论与展望

3.1实验结论

3.2实验展望

参考文献

在学期间的研究成果

致谢

附录