利用蜜蜂研究蜂王浆抗衰老的主要成分

摘要

蜜蜂是由三型蜂组成的一种社会性昆虫，因为工蜂的寿命较短，用蜜蜂作为抗衰老模型动物开展相关的研究时效会更好。蜂王浆是工蜂咽下腺和上额腺分泌的用于饲喂蜂王的乳白色、淡黄色或浅橙色浆状物质，富含蛋白质、碳水化合物、维生素和矿物质。具有多种医疗保健功效，是一种常见的保健食品。线虫寿命试验、果蝇寿命试验都证明了蜂王浆具有很好的抗衰老作用，具有延寿因子。本研究试图通过比较中蜂和意蜂在饲养盒内的存活情况，探索两种蜜蜂建立实验模型的可行性与差异性，并开展了蜂王浆的抗衰老作用和抗衰老的有效成分研究。研究结果如下：　　（1）蜂王浆成分的分离：新鲜蜂王浆经过磷酸缓冲液溶解、离心、硫酸铵沉淀和透析得到蜂王浆的水溶性蛋白组分提取RJP30和RJP60，得率分别为0.95％和10.83%。新鲜蜂王浆经过磷酸缓冲液溶解，离心和Tris-Hcl溶液透析得到蜂王浆粗蛋白，得率为11.07%。蜂王浆经95%的乙醇萃取，干燥得到醇提物（EERJ），得率为9.78%。　　（2）模型建立：实验室内恒温恒湿培养箱35℃，50%相对湿度条件下，饲喂相同饲料的盒养中蜂和盒养意蜂。比较他们的存活时间，实验发现中蜂在41天的试验期内死亡率极低，相比意大利蜜蜂，选择中蜂作为模型动物将增加试验周期。因此，我们认为中蜂作为模型动物还需要进一步深入探究。　　（3）蜂王浆的抗衰老作用：盒养意蜂作为模型动物，不同剂量的蜂王浆添加到50%的蔗糖溶液中，50%蔗糖溶液，牛血清蛋白作为对照组，观察蜜蜂的寿命。实验结果显示蜜蜂在25日龄之前，12%蜂王浆组的存活率较4%蜂王浆组高，8%蜂王浆组与4%蜂王浆组的存活率基本保持一致。试验结束时，4%蜂王浆组存活的蜜蜂数量最多，所以选择4%剂量的蜂王浆作为延长蜜蜂寿命试验的最佳蜂王浆添加量。　　（4）蜂王浆组分的抗衰老作用：将分离所得的RJCP，RJP30，RJP60和蜂王浆醇提物。分别添加至50%的蔗糖溶液中，实验结果表明RJP60可以有效延长蜜蜂的寿命。　　蜂王浆中除含有蛋白质以外，还含有大量的小分子活性物质。蜂花粉营养非常全面，被誉为“微型营养库”，所以，选择蜂花粉作为对照组研究蜂王浆的抗衰老作用，研究四种常见蜂花粉与蜂王浆对蜜蜂寿命的影响。实验结果表明蜂王浆延长蜜蜂寿命与其营养全面没有直接关系，蜂王浆中含有特殊的延寿因子。　　但是，电泳结果显示RJP60是一个混合物，其中的一个成分或者多个组分在蜂王浆延长蜜蜂寿命方面起主要作用，有待于进一步研究。

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第一章 绪论

1 蜂王浆

2 蜜蜂

3 抗衰老

4 本文研究的主要内容及意义

第二章 蜂王浆蛋白的分离纯化

1 实验材料和方法

2 实验结果

3 结论与讨论

第三章 蜜蜂延寿模型的建立

1 实验材料和方法

2 实验结果

3 结论与讨论

第四章 蜂王浆对蜜蜂寿命的影响

1 实验材料和方法

2 实验结果

3 结论与讨论

第五章 蜂王浆抗衰老的成分研究

1 实验材料和方法

2 实验结果

3 结论与讨论

第六章 结论和展望

结论

展望

参考文献

致谢