Hob5转分化来源的T细胞抗肿瘤及Hob5调控多能造血祖细胞功能的研究

目录

声明

摘要

第一章过表达Hoxb5将小鼠B细胞转分化为肿瘤特异性T细胞的研究

1．1引言

1．1．1肿瘤治疗方法的研究进展

1．1．2治疗性免疫细胞来源的研究进展

1．2实验材料与方法

1．2．1实验动物

1．2．2流式细胞分析分选所用单染补偿细胞制备

1．2．3流式方法鉴定小鼠基因型

1．2．4病毒包装实验

1．2．5 Pro-pre-B分离培养实验

1．2．6 Pro-pre-B感染Hoxb5逆转录病毒实验

1．2．7 Pro-pre-B移植实验

1．2．8受体鼠分析实验

1．2．9 BCR重链重排实验

1．2．10 OT1-iT体外功能验证

1．2．11 OT1-iT体内功能验证

1．3实验结果

1．3．2表达Hoxb5的OT1 pro-pre-B可以转分化为OT1-iT

1．3．3 OT1-iT体外杀伤表达OVA抗原的黑色素瘤细胞(B16F10-OVA)

1．3．4 IT1-iT细胞体内抗肿瘤功能评估

1．3．5 OT1-Hoxb5逆转录病毒将pro-pre-B转分化为OT1-iT细胞

1．4结果与讨论

第二章转录因子Hoxb5在多能造血祖细胞(MPP)中的功能研究

2．1引言

2．1．1维持机体长期造血功能的研究进展

2．1．2造血干细胞(HSC)的研究进展

2．1．3多能造血祖细胞(MPP)的研究进展

2．1．4转录因子Hoxb5的研究进展

2．2实验材料与方法

2．2．1实验动物

2．2．2 PCR方法鉴定小鼠基因型

2．2．3流式细胞分析分选所用单染补偿细胞制备

2．2．4 qPCR方法鉴定Hoxb5LSL/+Mx1-cre鼠中Hoxb5的表达

2．2．5移植实验(一次／二次／三次移植)

2．2．6检测小鼠外周血，脾脏，骨髓中的供体细胞状态

2．2．7受体鼠中供体祖细胞分析(Mac1+CD48+SK，CLP，MP)

2．2．8 CD48+Mac1+SK细胞的RNA-seq

2．2．9脐血来源的MPP感染HOXB5的移植实验

2．3实验结果

2．3．1在MPP中过表达Hoxb5后获得了长期造血的功能

2．3．2在MPP中过表达Hoxb5后产生了Mac1+CD48+sK的细胞类型

2．3．3 Mac1+CD48+SK细胞能够支持长期造血

2．3．4 Mac1+CD48+SK细胞的转录组分析显示出细胞增殖的特点

2．3．5人的脐带血来源的MPP过表达HOXB5后在B-NDG鼠中没有产生长期造血现象

2．4结果与讨论

参考文献

致谢

在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果