已酮可可碱对体外内毒素诱导大鼠心肌细胞生成TNF-α的影响

摘要

目的：肿瘤坏死因子α(TNF-α)在心力衰竭发生发展中具有重要作用，已证实慢性心力衰竭患者血浆TNF-α水平明显升高。已酮可可碱是一种黄嘌呤衍生物，临床试验证实它可以改善心力衰竭患者的临床状况；动物实验亦报道已酮可可碱作为一种免疫调节剂可以抑制人类单核细胞生成肿瘤坏死因子-α。因此我们假设在心肌细胞中它有相似的作用机制。此实验旨在通过观察已酮可可碱对内毒素诱导新生大鼠心肌细胞生成TNF-α的影响，探讨已酮可可碱对大鼠心肌细胞可能的保护机制。 材料与方法：取新生大鼠的心肌细胞加以培养，按不同的药物处理分为四组：对照组(A组)、1μg/ml已酮可可碱组(B组)、10μg/ml已酮可可碱组(C组)、100μg/ml已酮可可碱组(D组)。加入生理盐水(A组)和不同浓度的已酮可可碱(B、C、D组)作用一定时间后，再加入内毒素刺激TNF-α生成。作用6小时后，采用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定新生大鼠心肌细胞TNF-α的生成，用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测TNF-αmRNA的表达。 结果：已酮可可碱干预后，新生大鼠心肌细胞培养液中TNF-α的生成受到不同程度的抑制，且与预处理的已酮可可碱浓度呈正相关。其中1μg/ml已酮可可碱组、10μg/ml已酮可可碱组、100μg/ml已酮可可碱组的TNF-α的生成[(83.37±16.39)pg/ml，(35.43±2.60)pg/ml，(19.72±5.19)pg/ml]都显著低于对照组[(98.50±7.99)pg/ml](P＜0.05)；已酮可可碱干预后，新生大鼠心肌细胞TNF-αmRNA的表达均受到不同程度的抑制，且与已酮可可碱浓度呈正相关。其中1μg/ml已酮可可碱组、10μg/ml已酮可可碱组、100μg/ml已酮可可碱组心肌细胞TNF-αmRNA表达(0.78±0.02，0.71±0.04,0.62±0.04)都显著低于对照组(0.90±0.02)(P＜0.05)。 结论：已酮可可碱能有效抑制内毒素诱导的新生大鼠心肌细胞产生TNT-α，并能有效减少内毒素诱导的新生大鼠心肌细胞TNF-αmRNA的表达，且这些效应呈剂量依赖性。本实验结果表明已酮可可碱能有效调节TNF-α的生成，而且这一过程至少部分发生在转录水平。这一结果为已酮可可碱应用于治疗心力衰竭提供了实验依据。

目录

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

综述 慢性心力衰竭的抗肿瘤坏死因子治疗

硕士在读期间发表论文

致谢