不同鹰嘴豆品种异黄酮和皂甙含量的分析研究

摘要

鹰嘴豆起源于亚洲西部和近东地区，是世界上历史悠久且分布最广泛的食用豆类之一。本研究通过对鹰嘴豆籽粒中的异黄酮提取和测定方法的优化，建立了一套适用于测定鹰嘴豆总异黄酮的三波长紫外分光光度法。鹰嘴豆总异黄酮最佳提取条件为：0.30g不脱脂豆粉溶于25mL70﹪的乙醇，在60℃水浴温度下提取3小时；一次提取效率为86.5﹪，两次合并提取效率可达97.0﹪；建立的测定方法的精密度变异系数(CV)为1.14﹪，平均加标样回收率为99.0﹪，变异系数(CV)为3.2﹪。采用三波长测定可有效消除干扰物质对测定的影响，该方法具有操作简便、重现性好、精密度高等特点，适于大批量样品测定以及产品生产的质量控制及监测。 本研究借鉴比色法定量测定大豆皂甙的方法，采用香草醛．高氯酸一冰乙酸体系显色，再采用酶标仪结合三波长法测定和校正吸光值，通过对提取和测定方法的优化，建立了一套适用于测定鹰嘴豆总皂甙的三波长分光光度法。鹰嘴豆总皂甙最佳提取条件是：脱脂后取1.00g鹰嘴豆粕加入25 mL70﹪的乙醇，在70℃水浴温度下提取3小时；鹰嘴豆皂甙一次提取效率为95.09﹪，两次合并提取效率为98.51﹪；精密度试验的变异系数CV(﹪)为3.37，平均加标样回收率为95.57﹪，变异系数CV(﹪)为3.221；鹰嘴豆皂甙显色后的最大吸收峰会受到蛋白杂质的干扰，需采用HCl调节pH值沉淀蛋白。研究所建立的测定方法具有操作简便、重现性好、精密度高，适于大批量样品测定以及产品生产的质量控制及监测等特点。 通过以上建立的测定方法，对不同年份的33个不同鹰嘴豆品种中异黄酮和皂甙含量进行测定，并对数据进行了方差分析，结果如下：品种间总异黄酮含量的平均含量为0.051﹪，不同品种鹰嘴豆异黄酮含量主分布于0.0443﹪～0.0506﹪之间，鹰嘴豆品种175的异黄酮含量最高，为688.021ug/g；总皂甙含量的平均含量为6.29mg/g，鹰嘴豆皂苷含量主要分布于3.212 mg/g～16.059 mg/g。鹰嘴豆品种159皂甙含量为最高，达到15.9696mg/g。不同品种不同年份的鹰嘴豆品种异黄酮和皂甙的含量方差分析的结果均为：品种间、年份间差异是极显著的；区组间差异是不显著的；品种、年份间的互作的差异是显著的。 传统大豆制品通常是以整粒大豆为原料，利用蛋白质的某些特殊性质加工而成的。但是，关于豆腐加工过程中营养素的损失情况研究甚少，到目前为止，关于豆腐中异黄酮、皂甙的研究国内研究很少，国外的研究也不够系统。针对豆腐制作过程中异黄酮、皂甙保留量的多少较为系统的研究，以期指导生产实践。因此本研究使用鹰嘴豆制豆腐，并观察鹰嘴豆在深加工中其活性成分异黄酮、皂甙含量变化，从中挑选出最优品种。对11个不同鹰嘴豆品种制成的鹰嘴豆豆腐中异黄酮和皂甙含量进行测定，同时测定了鹰嘴豆豆腐产量，水分含量等指标。测定结果为：湿豆腐产量最高的是鹰嘴豆品种218；干豆腐产量最高的为鹰嘴豆品种219：水分含量最高的是鹰嘴豆品种218。制豆腐前后皂甙、异黄酮保留率最高的是鹰嘴豆品种193分别为29.43﹪和11.40﹪，而在11个鹰嘴豆品种中籽粒中皂甙含量最高的品种224(11.53mg/g)和异黄酮含量最高的品种166(223.954ug/g)在制成豆腐后其皂甙，异黄酮保留率均为9.51﹪和 7.678﹪，11个不同鹰嘴豆品种籽粒中异黄酮平均含量为184.421 ug/g、皂甙平均含量为7.628 mg/g，11个不同鹰嘴豆品种豆腐中异黄酮平均含量为8.915﹪，皂甙平均含量为0.686﹪；制豆腐前后异黄酮平均保留率为4.804﹪，皂甙平均保留率为9.239﹪。

目录

文摘

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第一章文献综述

第二章鹰嘴豆中异黄酮提取的研究

2.1材料与方法

2.1.1实验材料

2.1.2仪器设备和标样、试剂

2.1.3标准储备液及标准系列溶液的制备

2.1.4测定方法的研究

2.1.5鹰嘴豆样品中异黄酮含量的计算

2.2结果与分析

2.2.1鹰嘴豆籽粒中总异黄酮最大吸收波长及分析波长的的确定

2.2.2标准曲线统计检验

2.2.3样品的提取与纯化条件的优化

2.3讨论与结论

第三章鹰嘴豆中皂甙提取的方法研究

3.1材料与方法

3.1.1仪器、试剂与材料

3.1.2标准储备液及标准系列溶液的制备

3.1.3分析测定方法

3.1.4标准曲线的制备

3.1.5检出限的考察

3.1.6样品的提取与萃取条件的优化

3.2结果与分析

3.2.1皂甙显色反应及最大吸收波长的确定

3.2.2显色稳定性研究

3.2.3标准曲线与统计检验

3.2.4检出限浓度的确定

3.2.5样品的提取与萃取纯化条件的确定

3.3讨论与结论

第四章33个鹰嘴豆品种异黄酮和皂甙的含量测定与方差分析

4.1材料与仪器

4.2测定方法

4.2.1鹰嘴豆豆籽粒异黄酮含量的测定

4.2.2鹰嘴豆籽粒皂甙含量的测定

4.3结果与分析

4.3.1通过上述建立的方法对不同年份33个不同品种的鹰嘴豆中异黄酮和皂苷含量进行测定。

4.3.2频数分析

4.3.3方差分析

4.4结论与讨论

第五章鹰嘴豆豆腐的加工

5.1材料与仪器

5.2试验方法

5.2.1豆腐的制备

5.2.2鹰嘴豆豆腐产量及湿豆腐含水量测定

5.2.3鹰嘴豆豆腐中异黄酮含量的测定

5.2.4鹰嘴豆豆腐中皂苷含量的测定

5.3结果与分析

5.3.1豆腐产量

5.3.2制豆腐前后鹰嘴豆中鹰嘴豆活性成分变化：

5.4结论

第六章主要结论

参考文献

致谢

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