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贝伐单抗对氧诱导视网膜病变SD大鼠模型视网膜及玻璃体内VEGF含量的影响

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引言

第一章 材料与方法

1.1试验材料

1.1.1试验氧箱

1.1.2动物

1.1.3实验仪器

1.1.4实验试剂及配置

1.2实验方法

1.2.1实验动物分组

1.2.2动物模型建立及处理

1.2.3玻璃体腔内注射方法

1.2.4标本处理

1.2.5免疫组织化学SABC法

1.2.6 ELISA检测VEGF实验步骤

1.3统计学分析

第二章 结果

2.1各组SD大鼠不同时间点存活情况

2.2免疫组织化学染色

2.3免疫组化VEGF蛋白染色灰度值

2.4 ELISA测定结果

第三章 讨论

3.1氧疗对未成熟视网膜的影响

3.2氧诱导视网膜病变(OIR)动物模型的建立

3.3缺氧与VEGF及其受体的关系

3.4 VEGF及受体与新生血管的关系

3.5贝伐单抗

3.6展望

结论

参考文献

附图

VEGF与早产儿视网膜病变及相关治疗进展

攻读学位期间的研究成果

致谢

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摘要

目的:探讨氧诱导视网膜病变SD大鼠模型视网膜及玻璃体内VEGF的表达及贝伐单抗对其含量的影响。 方法:选择鼠龄为7天的SD大鼠共160只(320只眼)随机分成:正常对照组20只,高氧模型组20只,小剂量处理组20只,中等剂量处理组20只,大剂量处理组20只,小剂量平衡盐溶液(BSS)对照组20只,中等剂量BSS对照组20只,大剂量BSS对照组20只。除正常对照组之外,其余各组均放入氧分压为(75±2)%的氧箱内饲养5天后,与正常对照组一同在空气内再饲养5天。出氧箱时,给予小剂量处理组20只大鼠双眼玻璃体腔内注射贝伐单抗1μ1;中等剂量处理组20只大鼠,双眼玻璃体腔内注射贝伐单抗5μ1;大剂量处理组20只大鼠,双眼玻璃体腔内注射贝伐单抗10μ1。小剂量BSS对照组20只大鼠双眼玻璃体腔内注射BSS1μ1;中等剂量BSS对照组20只大鼠,双眼玻璃体腔内注射BSS5μ1;大剂量BSS对照组20只大鼠,双眼玻璃体腔内注射BSS10μ1;高氧模型组20只大鼠出氧箱后,不作任何处置。处死所有17天龄SD大鼠,取其眼球,选各组20只大鼠(40只眼)中的8只眼分别用1096甲醛固定、切片,行免疫组织化学法检测视网膜组织内VEGF表达;然后取出各组剩余32只眼的玻璃体;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定玻璃体内VEGF的含量。 结果:高氧模型组视网膜及玻璃体内VEGF含量较正常对照组显著升高(P<0.01)。随着贝伐单抗剂量的增加各治疗组视网膜及玻璃体内VEGF含量降低(P<0.05)。 结论:氧诱导视网膜病变动物模型建立成功;SD大鼠氧诱导视网膜病变的视网膜及玻璃体内VEGF浓度较正常组增高;贝伐单抗能降低氧诱导视网膜病变SD大鼠模型视网膜及玻璃体内VEGF的含量。

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