核桃青皮提取物抑菌活性研究

摘要

本试验于2006～2008年在北京农学院中心实验室进行。以苹果轮纹病菌、苹果腐烂病菌、桃褐腐病菌、苹果斑点落叶病菌、茄子枯萎病菌、小麦赤霉病菌6种病原真菌为靶标，对核桃青皮提取物进行抑菌活性测定。主要结果如下： 1.采用5种溶剂对核桃青皮进行平行提取，对6种供试病原真菌进行抑菌活性测定，结果表明，核桃青皮水提取液对供试的6种病原真菌抑制效果最好，抑制率达到96％以上，石油醚提取液对供试的6种病原真菌抑制效果最差。 2.选用石油醚、氯仿和乙酸乙酯对核桃青皮甲醇提取物的水溶液进行萃取，不同溶剂萃取物稀释成不同浓度后对6种供试病原真菌进行抑菌活性测定，结果表明，随着浓度的增大，各萃取物对不同病原菌的抑制效果随之增大，当浓度为4 mg.mL-1时，桃青皮甲醇提取物的氯仿萃取物对桃褐腐病菌的抑制效果最好，抑制率为71.54％，乙酸乙酯萃取物对小麦赤霉病菌的抑制效果最差，抑制率仅为18.32％。因此，选用核桃青皮甲醇提取物的氯仿萃取物作进一步的试验试材。 3.为了进一步纯化得到核桃青皮中的活性成分，采用柱层析对核桃青皮氯仿萃取物进行分离。以硅胶为吸附剂，选用石油醚和氯仿不同配比溶液作为洗脱液，薄层层析分析得到8个流分，并对各流分做了室内抑菌生测试验，结果表明，流分Ⅴ、Ⅵ和流分Ⅶ对6种病菌均表现出较好的抑菌活性，其中Ⅵ对桃褐腐病菌的抑制效果最好，抑制率为24.5％，流分Ⅴ对桃褐腐病菌的抑制活性次之，抑制率为16.62％。 4.通过显微镜观察，发现流分Ⅵ对桃褐腐病菌的菌丝形态结构有明显的破坏作用，表现为菌丝先断裂，细胞膨大呈泡囊状，之后菌丝呈串珠状膨大断裂成段，细胞质外漏。

目录

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第一章文献综述

1.1植物中杀菌、抑菌活性物质研究进展

1.1.1具有抗菌、杀菌活性的植物资源

1.1.2杀菌、抑菌活性物质在植物体内的分布

1.1.3植物中杀菌、抑菌活性物质的研究

1.1.4植物中杀菌、抑菌活性成分

1.1.5植物中有效成分的提取、分离和鉴定

1.1.6植物中活性成分杀菌机理研究

1.2新型植物源杀菌剂的研究与开发

1.2.1植物源杀菌剂的特点

1.2.2植物源杀菌剂的开发现状

1.2.3植物源杀菌剂的开发前景、存在问题及发展方向

1.3核桃属植物的研究概况

1.3.1核桃的生物学特性及用途

1.3.2核桃青皮中的化学成分及生物学活性研究

第二章材料与方法

2.1试验材料

2.1.1供试材料

2.1.2试验仪器

2.1.3试验试剂

2.1.4供试菌种

2.2提取和分离

2.2.1核桃青皮活性成分提取

2.2.2核桃青皮活性成分的萃取

2.2.3核桃青皮活性成分柱层析分离

2.3抑菌活性测定

2.3.1 PDA培养基的制作

2.3.2粗提物的抑菌活性测定

2.3.3萃取物抑菌活性测定

2.3.4流分抑菌活性测定

第三章结果与分析

3.1核桃青皮活性物质的提取

3.1.1最佳提取溶剂的确定

3.1.2核桃青皮的甲醇提取率

3.2核桃青皮甲醇粗提物的不同萃取物的抑菌作用

3.2.1不同萃取物的萃取率

3.2.2最佳萃取物的确定

3.3核桃青皮抑菌活性成分的抑菌作用

3.3.1核桃青皮各流分对苹果轮纹病菌的抑制作用

3.3.2核桃青皮各流分对苹果腐烂病菌的抑制作用

3.3.3核桃青皮各流分对桃褐腐病菌的生长抑制作用

3.3.4核桃青皮各流分对苹果斑点落叶病菌的生长抑制作用

3.3.5核桃青皮各流分对茄子枯萎病菌的生长抑制作用

3.3.6核桃青皮各流分对小麦赤霉病菌的生长抑制作用

3.4核桃青皮流分Ⅵ对桃褐腐病菌的抑菌机制的初步研究

3.4.1流分Ⅵ对桃褐腐病菌的抑菌生物活性测定

3.4.2流分Ⅵ对桃褐腐病菌菌丝形态结构的影响

第四章结论与讨论

4.1结论与讨论

4.1.1核桃青皮粗提物的抑菌活性物质

4.1.2核桃青皮萃取物的抑菌活性成分

4.1.3核桃青皮氯仿萃取物的柱层析分离

4.2有待进一步解决的问题

参考文献

致谢

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