蛋白质的疏水性吸附平衡模型及动力学研究

摘要

该文选取牛血清白蛋白（BSA）为模型蛋白,对BSA在疏水性吸附介质Phenyl Sepharose FF上的吸附平衡进行了研究.考察了影响蛋白质吸附平衡和动力学的因素,建立了描述蛋白质在疏水性吸附介质上吸附平衡的“两态模型（Two-State Protein Model）”.在“蛋白质两态平衡假设”基础上,建立了描述蛋白质在疏水性吸附介质上的疏水性吸附平衡模型.蛋白质在疏水性吸附剂上的吸附动力学可以用多孔粒子模型进行描述,求得有效扩散系数D<,e>.BSA在吸附剂内有的有效扩散系数D<,e>总体上随着盐浓度和配基密度的增大而增大,并与体系中盐的种类有关.该文研究表明,“蛋白质两态模型”较好的描述了蛋白质疏水性吸附平衡行为.

目录

文摘

英文文摘

前言

1文献综述

1.1疏水性层析技术简介

1.1.1疏水性层析的基本原理

1.1.2疏水性层析的作用体系

1.2疏水性相互作用的机制

1.3疏水性层析的影响因素

1.3.1固定相的疏水特性

1.3.2流动相

1.3.3 pH值

1.3.4温度

1.4生化研究方面的应用

1.4.1疏水性层析在生物大分子分离和纯化方面的应用

1.4.2疏水性层析用于变性蛋白质的复性

1.4.3疏水性层析用于蛋白质折叠机理的研究

1.4.4疏水性层析用于蛋白质分子构象变化的研究

1.5疏水性层析研究的展望

1.6本课题内容及意义

第1章参考文献

2疏水性吸附平衡特性

2.1前言

2.2实验部分

2.2.1实验材料

2.2.2吸附剂湿密度的测定

2.2.3蛋白质的吸附平衡实验

2.3实验结果与讨论

2.3.1吸附剂粒子的湿密度

2.3.2盐浓度对吸附BSA的影响

2.3.3盐的种类对吸附BSA的影响

2.3.4配基修饰密度对吸附BSA的影响

2.3.5缓冲体系对吸附BSA的影响

2.3.6 pH值对吸附BSA的影响

2.3.7温度对吸附BSA的影响

2.4小结

第2章参考文献

3疏水性吸附平衡模型

3.1前言

3.2蛋白质疏水性相互作用的吸附平衡模型

3.3实验材料与方法

3.4实验结果与讨论

3.4.1模型参数的求解

3.4.2模型参数求解精度分析

3.4.3影响模型参数的因素

3.4.4模型简化为四参数模型

3.4.5模型简化为Langmuir方程

3.5小结

第3章符号表

第3章参考文献

4疏水性吸附动力学

4.1前言

4.2吸附动力学模型

4.2.1吸附动力学理论

4.2.2吸附动力学模型

4.3动力学实验

4.3.1实验材料

4.3.2蛋白质的吸附动力学研究

4.4结果与讨论

4.4.1有效扩散系数的计算

4.4.2不同盐浓度下BSA的吸附动力学

4.4.3利用平行扩散模型研究吸附动力学

4.5小结

第4章符号表

第4章参考文献

5全文结论

致谢