免疫检测用单分散荧光及彩色功能基聚合物微球的制备

摘要

本文综述了基于聚合物微球的生物免疫诊断和测试，其中流式荧光免疫微球检测技术以其多参数同步分析，灵敏度高，操作简单，耗时及成本低等优势有着广泛的应用前景，本文制备了适用于该技术的单分散的带有荧光和羧基功能基，粒径在400nm～800nm之间的载体微球，另外，基于彩色微球的凝集测试在我国广大的基层有很大的应用前景，制备了三种颜色的彩色单分散羧基功能化微球。 先合成了五种含双键可聚合荧光染料单体，丙烯酰氯双取代的荧光素(AF)，单取代的荧光素(mono-AF)，对乙烯基苄氯双取代的荧光素(DiVF)，4-甲氧基-N-烯丙基萘甲酰亚胺(MleOApht)，4-丁胺基-N-烯丙基萘甲酰亚胺(ButylApht)。合成了两种含双键可聚合彩色染料单体，丙烯酰氯取代的油溶黄(AOY，粉红)，N-丙烯酰基-1，4-二氨基蒽醌(紫红)，加上DiVF(橙黄色)，共得到三种不同颜色的染料单体。 先尝试了无皂乳液聚合过程中吸附荧光物质的方法制备微球，得到的微球没有检测出荧光，而且微球的单分散性和表面形貌很差，于是接着尝试了无皂乳液共聚双键荧光染料单体制备微球，分别加入DiVF，MeoApht，ButylApht这三种荧光物质得到的微球能够检测出带有荧光，然而其单分散性和表面形貌都不理想。两步活性溶胀种子聚合法很好地解决了这些问题，制备出了粒径单分散的、表面光滑、表面带有羧基的荧光微球。先用无皂乳液聚合法制备出单分散苯乙烯种子，然后用邻苯二甲酸二丁酯(DBP)作为溶胀剂对微球进行溶胀，溶涨后的种子模板再用混溶的苯乙烯，二乙烯苯，丙烯酸，双键荧光染料单体以及引发剂(BPO)溶胀，升温聚合后可制得理想的微球，考察了DBP用量、用于第二步溶胀单体的用量和各单体间比例、染料单体对微球的形貌和单分散性的影响。我们还同时共聚两种荧光染料单体到同一微球上制备带有两种不同荧光的微球，实验结果表明，加入DiVF和MeoApht的混和染料单体能够得到理想的带有两种荧光的微球。 另外，还以两步活性溶胀种子聚合法分别共聚了DiVF，AOY，N-丙烯酰基-1，4-二氨基葸醌三种染料单体，制备了三种不同颜色的羧基单分散彩色微球。

目录

文摘

英文文摘

南开大学学位论文版权使用授权书及南开大学学位论文原创性声明

第一章绪论

1.1基于微球的免疫检测技术

1.1.1基本原理

1.1.2微球免疫检测发展概况

1.2微球制备方法

1.2.1微球制备

1.2.2荧光微球制备的研究情况

1.3本文工作

参考文献

第二章荧光染料单体和彩色染料单体的制备

2.1荧光素类双键染料单体的合成

2.1.1主要试剂及仪器

2.1.2合成方法

2.1.3结果及讨论

2.2 4-溴-1，8-萘酐类可聚合荧光单体的制备

2.1.1主要试剂及仪器

2.2.2合成方法

2.2.3结果及讨论

2.3彩色单体的制备

2.3.1主要试剂及仪器

2.3.2油溶黄(Fast Orange R)与丙烯酰氯反应制备可聚合彩色单体

2.3.3 1，4-二氨基蒽醌与丙烯酰氯反应制备可聚合彩色单体

2.3.4结果及讨论

本章小结

参考文献

第三章单分散荧光及彩色微球的制备

3.1无皂乳液聚合过程吸附荧光素制备微球

3.1.1实验方法

3.1.2结果及讨论

3.2无皂乳液苯乙烯，丙烯酸，荧光标记单体共聚合

3.2.1实验方法

3.2.2结果及讨论

3.3种子聚合法制备单分散荧光微球

3.3.1实验方法

3.3.2结果及讨论

3.4两步活性溶胀种子聚合法制备彩色微球

本章小结

参考文献

致谢