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北京某图书馆室内外空气真菌浓度时空变化及快速检测技术的初步研究

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缩略词表

前言

第一部分北京某图书馆室内空气真菌浓度时空变化的初步研究

第二部分荧光定量PCR检测空气真菌的初步研究

结论

参考文献

文献综述室内空气生物污染的研究进展

致谢

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摘要

室内空气质量问题近年来得到了极大关注,由于室内空气的生物污染物与多种健康问题密切相关,所以有效监控室内空气生物污染对改善人们的生活环境和工作环境非常重要。其中,真菌是重要的室内空气生物污染物,流行病学调查证明真菌污染与人类呼吸道疾病与不良建筑物综合症密切相关,因此了解室内空气真菌的时空分布规律,建立快速准确的空气真菌检测方法对于公共卫生体制的建设和居民生活质量的提高都具有重大意义。 本研究选取北京某图书馆为研究对象,选取图书馆三楼阅览室、五楼阅览室、地下封闭书库、六楼封闭书库、室外五个采样楼层,从2004年¨月到2005年10月分析了一年内北京地区室内空气真菌时空分布规律、优势真菌的种类和分布以及空气真菌颗粒粒径分布。结果表明,对于自然通风建筑物来说,室内空气真菌浓度与室外有相似的变化趋势;室外空气和人员流动是室内空气真菌的主要来源;通风和清扫能够有效地降低室内空气真菌浓度;枝孢霉属、青霉属、曲霉属是主要的室内空气真菌,青霉与曲霉作为主要的空气真菌致病原,在室内条件下其含量往往高于室外,冬春两季室内空气中青霉与曲霉的含量有较大升高;图书馆室内空气真菌粒径小于室外空气,阅览室空气真菌粒径主要为1.0~6.0[tm,封闭书库空气真菌粒径主要为1.0~3.51am,室内空气中的真菌颗粒更容易进入人体呼吸道。 由于培养计数法容易低估空气微生物浓度,本研究将常规PCR和荧光定量PCR方法引入空气真菌的检测。选用烟曲霉模式菌株,实验室条件下制备2×101-2x10。个/ml六个浓度梯度的真菌孢子悬液,珠磨器破碎孢子后纯化基因组DNA,分别用真菌简并引物和烟曲霉特异引物进行常规PCR和荧光定量PCR。结果表明分子生物学方法在空气真菌检测领域有着巨大的应用前景,常规PCR能够检测到每个反应体系中2个孢子的水平,荧光定量PCR的结果也很好的反映了起始模板浓度的差异,起始模板浓度越高,Ct值越低,Ct值和每反应体系中的孢子浓度对数值的相关系数为0.98815。 国内缺乏公共场所长时期的空气真菌本底调查数据,本研究通过监测北京一年内室内空气真菌浓度的季节性变化及影响因素,可以了解北京地区室内空气真菌不同月份的浓度变化、来源、优势种群以及多种影响因素,这既可以作为衡量室内空气质量(IAQ)的指标,也可以作为流行病学研究的本地调查。同时,这项研究有利于探讨真菌污染与呼吸道传染病、哮喘、建筑物综合症(SBS)的关系,为采取措施改善室内空气环境、提高居民生活质量奠定研究基础;同时,建立荧光定量PCR检测真菌的平台不仅可以更方便快捷、更快速准确的监测空气真菌污染,也可以作为生物气溶胶研究的新型研究方法加以应用。

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