亚砷酸抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤生长及其机制的研究

摘要

背景:胆囊癌(GBC)是胆道系统最常见的恶性肿瘤,由于其缺乏特异性的临床表现,确诊时多属晚期,手术切除率较低;且常规化疗药物对胆囊癌的疗效较差,因此需寻找治疗胆囊癌新的有效药物。亚砷酸(As2O3)在治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)中取得了突破性成果,近年来它在实体瘤的研究中颇受关注,目前发现亚砷酸已有用于头颈部肿瘤、乳癌、肺癌、膀胱癌、多发性骨髓瘤、神经母细胞瘤、食管癌、胃癌、肝癌等的治疗和研究,其对于APL和原发性肝癌有突出的疗效,但在国内外有关亚砷酸对于胆囊癌作用方面的研究甚少。
　　 目的:本研究将亚砷酸应用于荷人胆囊癌裸鼠,研究亚砷酸对荷瘤裸鼠移植瘤的治疗作用,并对其作用机制进行阐明。
　　 方法:取人胆囊癌细胞GBC-SD以生理盐水配制浓度成1×106浓度,对实验用BALB/c-nu/nu裸鼠皮下注射,建立人胆囊癌裸鼠模型。用As2O3(10mg/kg)为实验组,生理盐水(0.2ml/只)为对照组,尾静脉注射,1次/天,连续7天。比较两组裸鼠移植瘤的体积和瘤重,计算肿瘤生长抑制率。用原位末端标记法检测两组凋亡细胞,并每个切片任选3个高倍镜视野进行电脑半定量计数。用免疫组化法和Western Blot测定肿瘤组织中Bcl-2和Cyclin D1蛋白表达情况。用两组均数之间t检验比较是否存在差异。
　　 结果:亚砷酸组肿瘤的体积较同时间的对照组肿瘤明显下降,21天时亚砷酸组肿瘤的体积与瘤重分别为0.83±0.39cm3和0.526±0.269g,对照组为1.50±0.57cm3和0.992±0.40lg,两者有明显差异(P＜0.01),肿瘤生长抑制率为46.98％(P＜0.01)。亚砷酸组肿瘤凋亡细胞计数为57.9±9.75,对照组为22.2±3.79,凋亡细胞数明显升高(P＜0.01)。免疫组化法及Western Blot结果显示亚砷酸组Bcl-2和Cyclin D1蛋白表达均较对照组显著下降。
　　 结论:亚砷酸(10mg/kg)明显抑制荷人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能为通过下调Bcl-2和Cyclin D1基因表达来诱导胆囊癌细胞凋亡,从而抑制肿瘤生长。