苹果[Malus pumila mill.]S6PDH基因cDNA的克隆及其植物表达载体构建

摘要

山梨醇是蔷薇科植物主要的光合产物、运输糖和贮藏物质,起着其他植物中蔗糖的作用.山梨醇还是一种小分子渗透物质,可以改变细胞渗透势,因而与植物抗性密切相关.另外,果实的味道在很大程度上决定于山梨醇转变成的糖的类型.酶对山梨醇的代谢起关键作用,6-磷酸山梨醇脱氢酶(S6PDH)是山梨醇合成最重要的一种酶,催化6-磷酸葡萄糖转化为6-磷酸山梨醇,再通过6-磷酸山梨醇磷酸酯酶转变为山梨醇.鉴于此,一些学者对S6PDH进行了大量研究,取得了一定进展.该研究通过苹果S6PDH cDNA的基因克隆、序列分析及其植物表达载体的构建,为该基因转化其他非蔷薇科果树奠定重要基础,为进一步研究山梨醇的代谢及提高非蔷薇科果树抗性提供一种新途径.该试验首先以

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第一章文献综述

1蔷薇科植物山梨醇的研究

1.1山梨醇的含量及分布

1.2山梨醇的功能

2山梨醇的代谢及其相关酶的研究进展

2.1山梨醇的代谢研究

2.2山梨醇代谢相关酶的研究

3果树基因克隆研究进展

3.1果树目的基因分离与克隆常用方法

3.2目前果树已分离和克隆的目的基因

第二章试验内容

前言

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1叶片总RNA的提取

2.2RT-PCR体系的建立

2.3基因克隆

2.4序列测定与分析

2.5表达载体构建及转化农杆菌

3讨论

3.1关于山梨醇代谢酶的深入研究

3.2关于基因的克隆及分析

3.3关于植物表达载体构建及其转化农杆菌

4结论

参考文献

致谢

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