全面性癫癎伴热性惊厥附加症同胞患者GABA受体已知突变通道多态性分析

摘要

癫癎（epilepsyEP）是神经系统常见的一组疾病，主要是由一组不同的病因所导致的脑部神经元同步和异常放电，引起以意识障碍和（或）骨骼肌阵挛和（或）强直性抽搐为主要特征。目前全世界约有癫癎患者超过4000万，我国约900万。对癫癎的发病机制进行探讨，不仅有利于明确癫癎的具体发作原因及过程，及时给予干预治疗，而且对于纠正全社会对癫癎的错误观念，社会的和谐和稳定，也具有重要的意义。长期以来，许多的研究者对癫癎的发病机理及诊断治疗的研究取得了丰硕的成果。尤其近些年来，在神经递质和离子通道方面的研究如火如荼，也面临更多的机遇与挑战。
　　全面性癫癎伴热性惊厥附加症（GeneralizedEpilepsyWithFebrileSeizuresPlusGEFS+）是特发性全身性癫癎（idiopathicgeneralizedepilepsyIGE）中常见的一组疾病，呈常染色体显性遗传，有显著的遗传特性,外显率约为60％-89％，被认为可能是儿童期最为常见的一种遗传性癫癎综合征。目前发现的与GEFS+的发病有关研究成果最多，所发现的通道突变的种类也较多。其中γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutycAcidGABA)受体通道的突变的研究也有进展。目前发现的与GABA有关的突变位点包括R43Q、K289M、Q351XA322D,多为家系研究中发现，且阳性率很低。从理论上讲，同胞患病具有较高的遗传可能性。而家系中仅有同胞患病是一种特殊的类型。但目前未见到在同胞患者中进行GEFS+关于GABA受体通道突变的报道。
　　本实验选取了3组共6例GEFS+同胞患者，同时为了便于对比，选择了6例散发的GEFS+患者，抽取所有实验者的外周血，提取DNA,同时设计已知突变位点的相关外显子引物，分别为GABRG2中的外显子2，外显子8，外显子9，及GABRA1中的外显子10.利用所提取的DNA进行PCR反应以扩增相应的外显子序列。反应完成后行琼脂糖凝胶电泳以检测所获得的外显子序列条带位置是否与已知的外显子序列应处的位置一致。若一致，则认为反应成功，将反应产物送公司测序，结果反馈后利用软件进行与已知正常序列的比对，以查找是否存在突变及多态性位点。得出相应的结论。
　　实验结果：
　　（1）所有PCR反应产物经琼脂糖凝胶电泳后可见条带所处位置与已知序列的大小一致，认为反应是成功的。
　　（2）将反应产物送公司测序后反馈的序列结果与正常序列经比对后均未发现突变及多态性位点的存在。
　　本实验结论如下：
　　(1)在GEFS+同胞患者及散发患者中均未发现已知的GABA受体通道的突变位点的存在,该结果与目前国内关于GEFS+家系研究及散发患者的研究结果无差别。
　　(2)在GEFS+同胞患者及散发患者中均未发现已知GABA受体突变位点所在外显子序列中发现多态性的存在。
　　(3)在外显子8的下游的内含子序列中发现一处位点变化,但不能明确与GEFS+发病是否有关。

目录

封面

声明

目录

缩略语表

中文摘要

英文摘要

前言

文献回顾

一 癫癎

二 γ-氨基丁酸

三 GABA 受体通道突变

四 聚合酶链反应技术

正 文

实验 全面性癫癎伴热性惊厥附加症同胞患者 GABA 受体已知突变通道多态性分析

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4.讨 论

小 结

参考文献

附录

个人简历和研究成果

致谢