声明
摘要
缩略语表
第一章 绪论
1.1 褐藻胶
1.1.1 褐藻胶的来源
1.1.2 褐藻胶的结构与性质
1.1.3 褐藻胶的应用
1.1.4 褐藻胶低聚糖和寡糖的生物活性
1.2 褐藻胶的降解
1.3 褐藻胶裂解酶
1.3.1 褐藻胶裂解酶的分类
1.3.2 褐藻胶裂解酶的来源
1.3.3 褐藻胶裂解酶活性检测方法
1.3.4 褐藻胶裂解酶的构效关系研究
1.3.5 褐藻胶裂解酶的生物学功能
1.3.6 褐藻胶裂解酶的应用
1.4 立题依据与研究内容
第二章 褐藻胶裂解酶分泌菌株的分离与鉴定
2.1 实验材料
2.1.1 主要生化试剂和试剂盒
2.1.2 主要仪器
2.1.3 主要培养基
2.1.4 主要菌株
2.2 实验方法
2.2.1 细菌的分离培养
2.2.2 褐藻胶降解活性的测定
2.2.3 分子进化分析
2.2.4 细菌的形态特征与生理生化指标的测定
2.2.5 化学特征成分分析
2.3 结果与分析
2.3.1 褐藻胶裂解酶分泌菌株筛选结果
2.3.2 菌株产酶能力的评价
2.3.3 菌株s12T的分类学研究
2.3.4 菌株Dm15T的分类学研究
2.3.5 菌株Gy8T的分类学研究
2.3.6 菌株Sy30T的分类学研究
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 菌株s12T中褐藻胶裂解酶的生物信息学分析
3.1 材料与方法
3.1.1 菌株
3.1.2 基因组测序
3.1.3 数据库及在线软件
3.2 结果与分析
3.2.1 菌株s12T基因组基本信息
3.2.2 菌株s12T中褐藻胶裂解酶的一级结构分析
3.2.3 褐藻胶裂解酶结构域的预测
3.2.4 褐藻胶裂解酶中关键氨基酸的功能分析
3.2.5 褐藻胶裂解酶三维结构的预测
3.2.6 菌株s12T中褐藻胶代谢途径的预测
3.3 讨论
3.4 小结
第四章 褐藻胶降解菌s12T产酶条件及蛋白组分析
4.1 实验材料
4.1.1 菌株与培养基
4.1.2 主要仪器
4.2 实验方法
4.2.1 蛋白含量测定
4.2.2 TLC法检测酶解产物
4.2.3 Poly-G和Poly-M的制备
4.2.4 胞外蛋白样品的制备与预处理
4.3 结果与分析
4.3.1 菌株s12T产酶条件
4.3.2 酶解产物鉴定
4.3.3 菌株s12T胞外蛋白组分析
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 褐藻胶裂解酶基因的外源表达
5.1 实验材料
5.1.1 主要仪器
5.1.2 主要试剂和培养基
5.1.3 实验菌株和质粒
5.2 实验方法
5.2.1 重组蛋白表达载体的构建
5.2.2 重组酶的表达与纯化
5.2.3 重组酶的检测
5.3 结果与分析
5.3.1 alg2基因的外源表达及重组酶酶学性质研究
5.3.2 alg5基因的外源表达及重组酶酶学性质研究
5.3.3 alg1和alg6基因在大肠杆菌中的表达
5.4 讨论
5.5 小结
全文总结和展望
参考文献
附录
在读期间发表的学术论文
致谢