单齿螺肠道产褐藻胶裂解酶菌株的筛选、鉴别及酶学性质分析

摘要

以海藻酸钠为唯一碳源,从中国南北潮间带的单齿螺肠道中筛选得到1株高产褐藻胶裂解酶菌株ML17,经菌株形态特征分析和16S rRNA初步鉴定为Vibrio sp.ML17(菌种保藏编号:CGMCC No.20377).通过我妻氏血琼脂平板分析,该菌株没有溶血性,表明其安全性较好.通过单因素试验确定该菌株在海藻酸钠(5 g/L)、胰蛋白胨(5 g/L)、NaCl(30 g/L)、pH 7～8、30°C的条件生长最快,同时相比于其他已报道的产褐藻胶裂解酶菌株,Vibriosp.ML17在最适生长条件下10 h即可达到生长平台期,14 h达到最高产酶量,生长速度快、周期短的特点有利于其后续工业应用.此外,酶学性质分析结果证明,其所产褐藻胶裂解酶酶活力为26.31 U/mL;该粗酶的最适温度为40°C,在40和45°C具有一定的热稳定性;最适pH值为7.5;在5 mmol/L Na+和Ca2+的条件下,对酶活力有明显促进作用,Fe2+、Cu2+、Zn2+则有明显抑制作用.进一步的应用实验发现,Vibrio sp.ML17能够有效降解褐藻,在对海带和马尾藻处理72 h后,其降解率可分别达到44.0％和38.9％.鉴于Vibrio sp.ML17生长速度快且产酶性能好的特点,该菌株可望在褐藻寡糖的制备和水产养殖中的褐藻防治去除等领域发挥潜力.