柱前荧光试剂衍生化HPLC-MS法测定酚、胺和酸类化合物

摘要

高效液相色谱(HPLC)是现代分离测定的重要手段,应用于工业和研究领域的各个方面,极大地推动了化学学科的发展。然而,因为缺少通用的检测器及样品被测组分本身性质及其低含量的限制,并非所有化合物都可直接用于液相色谱分析。为此利用化学衍生反应改变被测化合物性质使之能够被灵敏、快速和自动化测定具有重要意义。本文重点研究了三种新型荧光标记试剂的合成和表征,优化了四种衍生试剂的衍生反应条件、色谱分离条件,并将建立的方法应用于不同样品的分析。具体工作如下:
　　 第一章:首先介绍了高效液相色谱的原理及化学衍生法中的柱前衍生和柱后衍生。其次综述了近年来出现的一些商品荧光标记试剂和本实验室合成的荧光试剂。简述了液质联用接口的发展过程。最后阐明了本课题的主要研究内容及其实际意义。
　　 第二章:设计并合成了三种荧光标记试剂:2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔哗)]-异丙基-4-甲基苯磺酸酯、1-(9-蒽甲基)-3-甲基吡唑啉酮、2-[12,13-二氢-(7H-二苯并[a,g]咔唑)]-乙醇氯甲酸酯。并对其结构进行了表征。
　　 第三章:将荧光标记试剂4-(1H-菲并[9,10-d]咪唑-2-)苯甲酸(PIBA)用于酚的高效液相色谱-质谱分析。通过对衍生化条件和色谱分离条件的优化,建立了酚的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法。并将该方法用于废水样品中酚的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。结果表明此方法具有良好的重现性和较高的检测灵敏度。
　　 第四章:将荧光标记试剂4-(1-甲基-1H-菲并[9,10-d]咪唑-2-)苯甲酸(MPIBA)用于芳香胺的高效液相色谱-质谱分析。通过对衍生化条件和色谱分离条件的优化,建立了芳香胺的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法。并将该方法用于污水中芳香胺的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。研究结果表明,此方法简单易行,检测灵敏度高。
　　 第五章:将荧光标记试剂2-[12,13-二氢-(7H-二苯并[a,g]咔唑)]-乙基氯甲酸酯用于脂肪胺的高效液相色谱分析。通过对衍生条件的优化,建立了脂肪胺的柱前衍生高效液相色谱的荧光检测法。
　　 第六章:将衍生试剂BCETs用于脂肪酸的高效液相色谱-质谱分析。建立了脂肪酸的柱前衍生色谱荧光检测法,并将该法应用于微孔草籽油中脂肪酸的测定。结果表明此方法能够实现微孔草籽油中脂肪酸的分析测定。

目录

文摘

英文文摘

第一章 高效液相色谱及荧光衍生化的应用进展

一液相色谱理论发展简况

二HPLC的优缺点

2.1 HPLC与经典液相色谱相比有以下优点

2.2 高效液相色谱的局限性

三高效液相色谱仪简介

四荧光理论及其影响荧光强度的因素

4.1 荧光现象的发现

4.2 影响荧光强度的因素

五衍生化

5.1 荧光标记试剂的选择

5.2 常用荧光标记试剂

六HPLC-MS的应用进展

七论文工作

第二章 荧光标记试剂的合成与表征

1.引言

2.2 -[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑)]-异丙基-4-甲基苯磺酸酯的合成与表征

2.1 合成路线设计

2.2 仪器与试剂

2.3 1,2,5,6-二苯并-3,4-二氢咔唑的合成

2.4.3 H-二苯并[a.g]咔唑的合成与表征

2.5 2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑)]-异丙醇的合成与表征

2.6 2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑)]-异丙基-4-甲基苯磺酸酯的合成

3.1 -(9-蒽甲基)-3-甲基吡唑啉酮的合成与表征

3.1 合成路线设计

3.2 仪器与试剂

3.3 9-葸甲基腙的合成

3.4 ,9-蒽甲基肼盐酸盐的合成

3.5 1-(9-葸甲基)-3-甲基吡唑啉酮的合成

4.2 -[12,13-二氢-(7H-二苯并[a,g]咔唑)]-乙基氯甲酸酯的合成与表征

4.1 路线设计

4.2 仪器与试剂

4.3 1,2,5,6-二苯并-3,4-二氢咔唑的合成(见上)

4.4 2-[12,13-二氢-(7H-二苯并[a,g]咔唑)]-乙醇的合成与表征

4.5 2-[12,13-二氢-(7H-二苯并[a,g]咔唑)-乙醇氯甲酸酯的合成与表征

第三章 衍生试剂4-(1H-菲并[9,10-d]咪唑一2-)苯甲酸(PIBA)用于酚类物质的高效液相色谱质谱分析

一实验部分

1.1 仪器与试剂

1.2 标准溶液配制

1.3 衍生化

1.4 色谱条件

1.5 质谱条件

1.6 实际样品处理

二结果与讨论

2.1 衍生条件优化

2.2 PTBA衍生物的质谱裂解解析(以2-萘酚为例)

2.3 线性回归方程和仪器的检测限

2.4 实际样品测量

三、结论

第四章 衍生试剂4-(1-甲基-1H-菲并[9,10-d]咪唑-2-)苯甲酸(MPIBA)用于芳香胺类的高效液相色谱质谱分析

一 实验部分

1.1 仪器与试剂

1.2 标准溶液的配制

1.3 芳香胺的衍生化

1.4 色谱及质谱条件

1.5 实际样品处理

二 结果与讨论

2.1 衍生条件优化

2.2 MPIBA衍生物的质谱裂解解析

2.3 线性回归方程和仪器的检测限

2.4 实际样品测量

第五章 衍生试剂2-[12,13-二氢-(7H-二苯并[a,g]咔唑)]-乙醇氯甲酸酯用于脂肪胺类的高效液相色谱分析

一实验部分

1.1 仪器与试剂

1.2 标准溶液的配制

1.3 衍生化

1.4 色谱条件

二结果与讨论

2.1 衍生条件优化

第六章 衍生试剂2-(11H-苯[a]咔唑)乙基对甲苯磺酸酯(BCETS)用于脂肪酸类的高效液相色谱分析

一实验部分

1.1 仪器与试剂

1.3 衍生化

1.4 色谱条件

1.5 质谱条件

1.6 实际样品处理

二结果与讨论

2.1 SCCE条件优化

2.2解析

2.3 、线性回归方程和仪器的检测限

2.4 实际样品测定

三结论

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文

致谢