HPLC法检测葡萄酒中的生物胺

摘要

本文建立了关于葡萄酒中生物胺的一种柱前衍生反相高效液相色谱-紫外检测的测定方法，方法为以高氯酸提取葡萄酒中的生物胺，丹磺酰氯为衍生剂，1，7-二氨基庚烷为定量内标，采用C18色谱柱分离，流动相为乙腈和水，梯度洗脱，流速为1 ml/min，总共用时18分钟，紫外检测波长254nm。建立对于葡萄酒中生物胺定性和定量检测有较高灵敏度、准确性和可靠性的方法，可以满足葡萄酒中生物胺检测和分析的需要，这也为进一步研究工作的开展奠定了基础。色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、精胺和亚精胺等七种生物胺在18分钟内得到了良好的分离。在0.1～20 mg/L浓度范围内，各组分生物胺呈现良好线性相关(r＞0.9)。在葡萄酒中添加生物胺混合标准溶液，平均回收率为95.63％～104.79％，相对标准偏差RSD小于10％。检测了四种酒样并利用此方法对发酵过程中的赤霞珠和莎当妮等品种葡萄酒内生物胺浓度的变化进行了检测。结论:本文采用柱前衍生反相高效液相色谱-紫外检测，建立了简便易行的测定方法以满足葡萄酒中生物胺检测的需要。通过检测并记录赤霞珠和莎当妮葡萄酒酿造过程中生物胺浓度的变化，发现在酒精发酵过程中生物胺的含量均很低，而在苹果酸乳酸发酵过程中葡萄酒内的生物胺含量都有增加的趋势。由此推测苹果酸乳酸发酵中存在的细菌是葡萄酒中生物胺的主要来源。

目录

摘要

1．绪论

1．1 葡萄酒简介与分类

1．2 葡萄酒与葡萄酒中生物胺的关系

1．2．1 苹果酸乳酸发酵

1．3 生物胺

1．3．1 生物胺的化学结构

1．3．2 生物胺的来源及相关反应和条件及其生理作用

1．3．3 生物胺的生产菌

1．4 影响微生物产生生物胺能力的因素

1．4．1 pH值

1．4．2 温度

1．4．3 含盐浓度

1．4．4 氧气接触量

1．5 本论文的创新点

2．葡萄酒中生物胺RP-HPLC测定方法的建立

2．1 前言

2．1．1 生物胺的检测方法

2．1．2 衍生化试剂及条件选择

2．2 材料与方法

2．2．1 试剂

2．2．2 标准溶液

2．2．3 仪器与设备

2．2．4 色谱条件

2．2．5 样品前处理

2．2．6 衍生

2．2．7 标准品的定性

2．2．8 标准工作曲线的测定

2．2．9 精密度的测定

2．2．10 回收率的测定

2．3 结果与讨论

2．3．1 标准样品的定性实验

2．3．2 标准工作曲线的制作

2．3．3 精密度实验

2．3．4 回收率的测定

2．3．5 生物胺浓度计算

2．3．6 丹磺酰化衍生条件的选择

2．3．7 内标的选择

2．4 本章小结

3．市售品牌葡萄酒样品内生物胺含量的测定

3．1 前言

3．1．1 酒样处理方法选择与优化

3．2 材料与方法

3．2．1 材料

3．2．2 仪器设备

3．2．3 色谱条件

3．2．4 实验方法

3．3 结果与讨论

3．3．1 葡萄酒样品色谱图与分析

3．3．2 葡萄酒样品生物胺含量

3．3．3 可重复双因素方差分析

3．3．4 葡萄酒前处理方法

3．3．5 提取酸的选择

3．3．6 葡萄酒样品的选择

3．4 章末小结

4．不同品种葡萄酒发酵过程中生物胺含量的变化

4．1 前言

4．2 材料与方法

4．2．1 材料

4．2．2 仪器设备

4．2．3 色谱条件

4．2．4 实验方法

4．3 结果与讨论

4．4 章末小结

5．生物胺的安全性

结论

参考文献

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致谢

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