沙蚕毒素类杀虫剂巴丹对绿猴肾细胞毒性及其作用机制的研究

摘要

目的 研究沙蚕毒素类杀虫剂巴丹对绿猴。肾细胞(Vero cell)的毒性作用及ca<'2+>、氧化应激在其引起的细胞损伤中发挥的作用，为研究此类化学物质给人类和动物的危害提供依据。 方法 以0.01mmol/L-lmmol/L浓度的巴丹作用于Vero细胞4h、8h、12h、24h、48h，通过MTT法观察细胞存活率；以0.01mmol/L-1mmol/L浓度的巴丹作用于Vero细胞8h、12h、24h、48h，检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率；0.01 mmol/L、0.1mmol/L、1mmol/L巴丹作用于vero细胞8h、12、24h后倒置显微镜下观察细胞形态，照相记录；分别以抗氧化剂VitC(维生素C)10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L，Ca<'2>通道阻滞剂Ver．(维拉帕米)0.001 mmol/L、0.005 mmol/L、0.1 mmol/L，ca<'2+>鳌合剂EGTA 0.5μmol/L、1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L预处理Vero细胞：30min后加入0.01mmol/L-1mmol/L浓度的巴丹共同作用于Vero细胞24小时， MTT法检测细胞存活率、LDH漏出率；以10μmol/L、50μmol/L、100μmol/LmVitC，0.001mmol/L、0.005mmol/L、0.1mmol/L Ver．作用于Vero细胞30min后加入各浓度巴丹继续作用1h，荧光分光光度计检测Vero细胞内ROS含量。 结果 巴丹能引起Vero细胞LDH漏出率升高、细胞存活率下降、细胞内ROS水平升高，呈时间、剂量依赖关系，细胞形态变化明显，出现坏死，时间延长、剂量加大，细胞坏死加快。应用VitC、Ver．后细胞坏死减轻，细胞存活率增高，LDH漏出率下降，ROS降低。应用EGTA后，细胞坏死加重。 结论 巴丹对Vero细胞存在明显毒性作用，ca<'2+>以及氧化应激在其引起的细胞坏死中发挥重要作用。对进一步研究沙蚕毒素类农药引起细胞损伤的机理奠定基础，为研究和防治沙蚕毒素类农药造成的人类及动物的危害提供依据。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

材料和方法

1.材料

2.方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述沙蚕毒素类杀虫剂对人类对环境的危害及农药诱发细胞调亡机制的研究进展

攻读学位期间成果

致谢