大叶紫金牛活性成分的研究

摘要

本论文利用多种现代色谱手段从紫金牛科紫金牛属植物大叶紫金牛(Ardisia gigantifoliaStapf)干燥根茎60％乙醇提取物中分离得到了17个化合物。通过化学和光谱学(IR、MS、NMR)方法鉴定了它们的结构，分别为：没食子酸(1)，(2R,3S,4S,4aR，10bS)-(-)-岩白菜素(2)，(2R,3S,4S,4aR，10bS)-(+)-8-O-(3′，5′)-二甲基没食子酰基岩白菜素(3)，(-)-10b-羟基岩白菜素(4)，(+)-5-(1′，2′-二羟基戊基)-苯-1，3-二醇(5)，(-)-5-(1′，2′-二羟基戊基)-苯-1，3-二醇(6)，(-)-表儿茶素(7)，(-)-4′-羟基-3′，5′-二甲氧基苯基-β-D-[6-O-(4″-羟基-3″，5″-二甲氧基苯甲酰基)]-葡萄糖苷(8)，(-)-4′-羟基-3′-甲氧基苯基-β-D-[6-O-(4″-羟基-3″，5″-二甲氧基苯甲酰基)]-葡萄糖苷(9)，(-)-4′-羟基-2′，6′-二甲氧基苯基-β-D-[6-O-(4″-羟基-3″-甲氧基苯甲酰基)]-葡萄糖苷(10)，(-)-3′-羟基-4′-甲氧基苯基-β-D-[6-O-(4″-羟基-3″，5″-二甲氧基苯甲酰基)]-葡萄糖苷(11)，β-谷甾醇(12)，3β-O-{α-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[β-D-吡喃木糖基-(1→2)]-β-D-吡哺半乳糖基-(1→4)-[β-D-毗喃葡萄糖基-(1→2)]-α-L-吡喃阿拉伯糖基)-16α-羟基-13,28-环氧齐墩果烷(13)，3β-O-{α-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-β-D-毗喃木糖基-(1→2)]-β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]-α-L-吡喃阿拉伯糖基}-16α-羟基-13,28-环氧齐墩果烷(14)，3β-O-{α-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[β-D-吡喃木糖基-(1→2)]-β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]-α-L-毗哺阿拉伯糖基}-西克拉敏A(15)，3β-O-{α-L-吡哺鼠李糖基-(1→3)一[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-β-D-吡喃木糖基-(1→2)]-β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]-α-L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(16)，3p-O-{α-L-吡哺鼠李糖基-(1→3)-[β-D-吡喃木糖基-(1→2)]-β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-[β-D-毗喃葡萄糖基-(1→2)]-α-L-吡哺阿拉伯糖基}-16α-羟基-13,28-环氧-30-乙酰氧基齐墩果烷(17)。 17个化合物中，有1个小分子酚酸类化合物(化合物1)，3个香豆素类化合物(化合物2-4)，2个酚类化合物(化合物5，6)，1个黄烷类化合物(化合物7)，4个酚苷类化合物(化合物8-11)，1个甾醇类化合物(化合物12)以及5个三萜皂苷类化合物(化合物13-17)。新化合物共6个，分别为化合物3-6，10，11，化合物8和9为首次从该属植物中分离得到，化合物1和7为首次从该种植物中分离得到。 采用抑制大鼠巨噬细胞NO释放的活性测试方法，对非皂苷类化合物进行了活性评价，发现酚苷类化合物8，10显示出了很强的NO释放抑制作用，并具有初步的构效关系。 采用清除1，1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)自由基的活性测试方法，考察了非皂苷类化合物的体外抗氧化能力。结果表明化合物1，5，7，8，11具有很好的清除DPPH自由基的作用，并具有初步的构效关系。 本课题组张晓明硕士曾经从大叶紫金牛中分离得到过11个三萜皂苷类化合物，初步体外细胞毒活性测试结果显示，部分三萜皂苷类化合物对NCI-H460(人非小细胞肺癌)、SF-268(人神经胶质瘤)、MCF-7(人乳腺癌)以及HepG2(人肝癌)细胞具有很强的细胞毒活性。本论文对大叶紫金牛中含量较大、活性显示较好的三萜皂苷类化合物进行累计，得到化合物13-17。 本论文发现，该植物中大量含有的没食子酸、岩白菜素以及含有其片段的衍生物具有抑制大鼠巨噬细胞NO释放、清除DPPH自由基的生物活性，部分三萜皂苷类化合物具有抗癌活性，结合其民间药用我们推测大叶紫金牛的疗效是由于该植物中所含有的酚酸类和酚苷类成分具有潜在的iNOS选择性抑制、抗氧化以及三萜皂苷类成分抗癌作用的综合体现。在上述工作的基础上，建立了活性部位群乙酸乙酯萃取物的指纹图谱。本文为今后对该种中草药的开发和利用提供了初步的理论和实验依据。

目录

论文说明：缩略语说明

声明

附图

摘要

第一章 前言

第二章 大叶紫金牛化学成分的研究

第一节 化学成分的分离

第二节 从大叶紫金牛中分离得到的化合物名称、编号和结构

第三节 化合物的结构鉴定

3.1 新化合物的结构解析

3.2 已知化合化的结构解析

第三章 单体化合物的生物活性评价

第一节 大鼠巨噬细胞NO释放抑制活性

1.1 抑制大鼠巨噬细胞NO释放体外活性筛选模型的生物学基础

1.2 实验方法的确立

1.3 NO释放抑制活性测试

1.4 小结

第二节 1，1-二苯基-2-苦基苯肼自由基(DPPH·)清除活性

2.1 基本原理

2.2 实验方法及结果

2.3 小结

第三节 活性部位群指纹图谱的建立

3.1 实验条件

3.2 指纹图谱的测定

3.3 小结

第四章 小结与讨论

第五章 实验部分

第一节 实验仪器与材料

第二节 大叶紫金牛中化学成分的结构鉴定数据

参考文献

致谢

附图