传统酸菜中抗菌性乳酸菌的筛选及其细菌素研究

摘要

本实验以内蒙古东部地区牧民家庭传统方式发酵的酸菜液中分离出的84株乳酸菌（球菌60株，杆菌24株）为供试菌株，以大肠杆菌AS1.487为指示菌，采用平板打孔扩散法进行抑菌性能初步筛选。再以蜡状芽孢杆菌、藤黄微球菌及部分真菌为指示菌进行抑菌性能复筛，并对备选菌株所产细菌素的生物学特性及纯化进行了初步探讨。结果表明，84株供试乳酸菌中有27株乳酸菌对指示菌大肠杆菌AS1.487抑菌效果明显（抑菌圈均达到14.0mm以上）。经过多种指示菌的反复筛选，获得了一株抑菌作用较广的乳酸菌素产生菌 S1-4。该菌株不仅能抑制典型的G+和G-细菌（如蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌等），且排除酸干扰后对扩展青霉等真菌仍有一定的抑制作用。乳酸菌S1-4所产细菌素的活性区域为酸性或弱酸环境，pH4.0时抑菌性能最强，且该细菌素pH值在2.0-5.5之间对热有耐受性，121℃处理30 min仍具有93.42％活性。经酶处理得知，该乳酸菌所产的细菌素对木瓜蛋白酶较敏感（抑菌活性下降了18.42%），但对胃蛋白酶和胰蛋白酶敏感性较弱。以硫酸铵梯度沉淀法分离并收集乳酸菌S1-4的发酵上清液，采用膜透析技术获得的分子量在3.5kDa-8kDa的组分对蜡样芽孢杆菌的抑菌效果最明显。且经SephadexG-15柱层析纯化所得三个峰中，第二个峰收集的组分具有一定的抑菌活性。经推断该细菌素的主要抑菌活性物质分子量约为6.7KDa，是一种小分子多肽，此峰的精纯组分可用于进一步研究。最后通过生理生化及分子生物学实验等特性研究，初步鉴定乳酸菌S1-4为植物乳杆菌。

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1 引言

1.1 研究背景

1.2 乳酸菌简介

1.3 细菌素的概况

1.4 存在问题及展望

1.5 本研究的主要内容及意义

2 材料和方法

2.1 试验材料

2.2 实验方法

3 结果与分析

3.1 筛菌试验

3.2 乳酸菌 S1-4所产细菌素的理化特性

3.3 S1-4 乳酸菌素的分离纯化

3.4 乳酸菌S1-4的形态特征及菌种鉴定

4 结论

致谢

参考文献

作 者 简 介