论文说明
摘要
符号说明
第一章 文献综述
1.1 卵泡颗粒细胞
1.2 CDC25C基因与细胞周期
1.3 CDC25C与相关基因的关系
1.4 本研究的目的和意义
第二章 CDC25C基因表达载体的构建及其在山羊卵泡颗粒细胞中的功能分析
2.1 试验材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 器材的准备
2.1.3 主要试剂
2.1.4 主要溶液配置
2.2 试验方法
2.2.1 山羊卵巢颗粒细胞的分离培养
2.2.2 中性红染色液(活细胞染色)
2.2.3 免疫荧光染色
2.2.4 山羊颗粒细胞总RNA的提取和检测
2.2.5 过表达重组载体的构建
2.2.6 山羊卵巢颗粒细胞转染
2.2.7 荧光定量PCR
2.2.8 不同处理组中孕激素和E2含量的检测
2.2.9 成年母羊与幼龄母羊卵巢切片观察及二者卵泡颗粒细胞所处细胞周期比较
2.2.10 数据处理
2.3 实验结果
2.3.1 山羊卵泡颗粒细胞体外培养
2.3.2 pCMV-HA载体-CDC25C构建
2.3.3 荧光定量PCR结果
2.3.4 酶联免疫分析法测定PROG和E2激素量的实验结果
2.3.5 成年母羊与幼龄母羊卵巢切片观察及二者卵泡颗粒细胞所处细胞周期比较
2.4 讨论
2.4.1 CDC25C基因相对表达量
2.4.2 CDC25C基因对CDK1和WEE1基因的影响
2.4.3 CDC25C基因对PROG和E2的影响
第三章 CDC25C基因siRNA的构建及其在山羊卵泡颗粒细胞中的功能分析
3.1 试验材料
3.1.1 主要仪器
3.1.2 器材的准备
3.1.3 主要试剂
3.2.3 免疫荧光染色
3.2.4 山羊颗粒细胞总RNA的提取和检测
3.2.7 荧光定量PCR
3.2.8 不同处理组中孕激素和E2含量的检测
3.3.2 siRNA序列
3.3.3 荧光定量PCR结果
3.3.5 成年母羊与幼龄母羊卵巢切片观察及二者卵泡颗粒细胞所处细胞周期比较
3.4 讨论
3.4.2 CDC25C基因对CDK1和WEE1基因的影响
3.4.3 CDC25C基因对PROG和E2的影响
全文结论
参考文献
致谢
声明