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肺心汤含药血清对体外肺动脉平滑肌细胞增殖及PHD2、HIF-1α、VEGF的影响

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第一部分大鼠血清中羟基红花黄色素A、丹酚酸B、苦杏仁苷和芍药苷的血药浓度测定

前言

材料与方法

结果与讨论

参考文献

附录

第二部分肺心汤含药血清对体外肺动脉平滑肌细胞增殖及PHD2、HIF-1α、VEGF的影响

前言

材 料 与 方 法

实 验 结 果

讨论

结论

参考文献

附录

综述

参考文献

硕士期间撰写的论文和获得的科研项目

致谢

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摘要

【目的】:
  本实验拟通过肺心汤含药血清、PHD2siRNA联合处理体外培养肺动脉平滑肌细胞,探讨肺心汤含药血清对低氧环境中离体大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及PHD2、HIF-1α、VEGF的影响。
  【方法】:
  第一步,慢病毒转染体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞;第二步,用经证实含有肺心汤有效中药成分群的大鼠含药血清、正常空白血清培养大鼠肺动脉平滑肌细胞;第三步,采用实时荧光定量(Real-time PCR)测定各处理组HIF-1α、PHD2、VEGF、cyclinD1 RNA表达量,Western-blot测定各处理组HIF-1α、PHD2、VEGF、cyclinD1蛋白表达量,流式细胞术测定各处理组细胞周期变化。
  【结果】:
  1. Real-time PCR、Western-blot结果中,PHD2三组干扰序列,LV-1能明显降低PHD2mRNA、蛋白表达。
  2.低氧环境中,Real-time PCR、Western-blot结果中肺心汤含药血清处理组与空白组比较,PHD2无明显变化(P>0.05),HIF-1α、VEGF表达均表达明显减少(P<0.05)
  3. Real-time PCR、Western-blot结果中肺心汤含药血清处理组与空白组比较, cyclinD1表达明显减少,细胞周期检测中肺心汤含药血清处理组与空白组比较,增殖指数(Proliferation index,PI)明显增加(P<0.05)。
  【结论】:
  1.肺心汤含药血清是通过PHD2调控HIF-1α表达来参与肺动脉平滑肌细胞增殖的调控的。
  2.肺心汤含药血清能降低肺动脉平滑肌细胞增殖,降低HIF-1α、VEGF表达。

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