猪伪狂犬病病毒(HNX株)致病性测定与分析

摘要

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒（porcine pseudorabies virus PRV）引起的一种急性、热性传染病。目前，gE基因缺失疫苗在猪伪狂犬病防控净化工作中发挥重要作用。然而新发变异毒株的出现，使得现有疫苗的保护效力变得更加有限，即使按程序免疫，猪场还是有可能感染或爆发猪伪狂犬病。2012年本实验室在一家发生猪伪狂犬病猪场分离到一株猪伪狂犬病病毒，命名为 HNX株。全基因组测序确定该毒株发生多处变异，通过交叉保护中和试验验证其抗原性也发生明显变异。
　　本研究主要内容包括：⑴分别在PK-15细胞、Vero细胞上接种HNX株病毒和鄂A（Ea）株病毒。两株病毒所引起的细胞病变差异显著。HNX株病毒引起的细胞病变为细胞变圆融合成合胞体状，有拉网现象；Ea株病毒引起的细胞病变为细胞变圆呈葡萄串状。两株病毒分别在同一细胞上增殖产生的病毒毒价差异不显著，同一病毒株在不同细胞上增殖产生的病毒毒价差异不明显，HNX株在不同细胞上增殖能产生与Ea株近似的高毒价（108.1～108.5TCID50/mL）。两株病毒分别在两种细胞上的增殖速度明显不同， HNX株病毒明显快于Ea株病毒，HNX株病毒在接种12h就可以观察到明显的细胞病变。⑵15头50日龄的PRV阴性仔猪分为感染组和对照组，感染组5头滴鼻接种1mL107 TCID50的HNX株病毒，5头滴鼻接种1mL107 TCID50的鄂A株病毒，对照组5头滴鼻接种1mL DMEM稀释液。接种HNX株病毒的实验猪临床症状明显，体温和排毒量明显高于接种鄂A株病毒组，HNX株病毒组死亡率为60％（3/5），鄂A株病毒组死亡率为0（0/5）。HNX株病毒组血清中抗gE蛋白抗体始终高于鄂A株病毒组。HNX株病毒组的试验猪病理变化程度比鄂A株病毒组的严重，使用常规PCR方法检测组织样品，HNX株病毒组中病原检出率远高于鄂A株病毒组。结果表明HNX株病毒致病力显著增强。⑶16头80日龄的PRV阴性猪分为两组，一组6头免疫Bartha-K61株疫苗；另一组10头不免疫。免疫后21d，选4头未免疫猪肌肉接种107TCID50的HNX株病毒，每组2头混入猪群，隔离饲养。同居感染后7d，免疫猪和未免疫猪均出现典型的临床症状，体温明显升高，疫苗免疫能够减少免疫猪排毒，但不能阻止排毒，表明Bartha-K61株疫苗阻止PRV HNX株水平传播的效力是有限的；同居感染期间，每组中6头被动感染猪均表现敏感，表明PRV HNX株具有较强的水平传播能力。

目录

声明

缩略语表(Abbreviation)

前言

1 PR病原

2 PRV病原结构及基因组结构

3 PRV的培养

4 PRV的流行病学

5 PRV的致病特征

6 国内流行毒株的毒力特征

7 PR的防控

8 研究目的和意义

材料与方法

1材料

2方法

结果与分析

1 HNX株的增殖特性

2 HNX株的致病能力

3 HNX株在免疫猪群中的水平传播能力

讨论

1 HNX株的增殖特性

2 HNX株的致病能力

3 HNX株在免疫猪群中的水平传播能力

结论

参考文献

致谢