射干的RAPD研究及种质资源描述规范与保存规范的制定

摘要

射干为鸢尾科植物射干(Belamcanda chinensis L.)DC.的干燥根茎。为常用中药，始载于《神农本草经》，也是湖北的道地药材之一。具有解毒利咽、清肺去痰、散血消肿之功效。对流感、咳嗽、哮喘、扁桃体炎、咽喉炎、急性喉头水肿、肺炎、泌尿系统感染、胃肠炎等病症有较好的疗效，临床应用广泛。 本文对射干近年来在各方面的研究进展作了综述，对射干古今本草中的记载和应用作了梳理。主要从对射干种质资源进行了研究：①采用RAPD分子标记技术对射干不同种质的遗传多样性和亲缘关系进行了研究；②制定了射干种质资源保存规范。研究结果如下： 1．实验对反应体系中5个重要因子进行了正交试验，筛选出最优的反应体系，并在此最优体系的基础上，分别对退火温度、退火时间、扩增循环数进行了单因素试验，得到了RAPD反应合理的热力学参数，确定了一套优化的射干RAPD反应体系和PCR扩增条件。 2．从100条随机引物中筛选出了14条具有多态性且重复性好的引物对湖北省16个不同产区的射干试样进行RAPD标记研究，共扩增出126个条带，其中多态性条带96个，占总扩增条带数的76.2％，每个引物可扩增出4～9个条带，平均为6.9个，证明不同产地的射干有丰富的遗传多样性。 3．样品间相似系数矩阵测度值为0.073～1.000，其数值越大表示遗传距离越近。聚类分析结果中，供试品种被聚为5类，从树状图中可以直观地看出绝大多数地理分布距离越近的样品，在聚类树状图上的距离较近，说明它们之间的遗传背景差异越小，反之越大。但生态条件特别是小生态环境对射干遗传差异的影响亦不可忽视。射干RAPD多态性的聚类分析结果与湖北省射干主要产区的地理分布比较吻合，同一地理分布范围内，产地生态环境条件不同，射干的遗传背景也存在不同程度的差异。 4．通过查阅文献，收集资料，调查、整理本项目研究结果，制定了射干种质资源描述规范及保存规范，规定了射干种质资源产地保存的栽培环境、适宜条件、栽培技术及方法。

目录

声明

前言

第一部分射干的RAPD研究

1实验材料

2试剂与仪器

3实验方法

4结果与分析

5讨论

第二部分射干种质资源描述规范及保存规范

引言

1射干种质资源描述规范

2射干种质资源保存规范

第三部分文献综述

1射干的研究进展

2RAPD技术在中药研究中的应用

第四部分结语

参考文献

致谢