酒速愈对急性酒精中毒小鼠解酒作用及其保护机制研究

摘要

在建立急性酒精中毒小鼠模型基础上，通过动物实验，探讨酒速愈对急性酒精中毒小鼠的解酒作用及其保护机制，为治疗急性酒精中毒的临床用药提供实验依据。 方法第一部分：酒速愈对急性酒精中毒小鼠解酒促醒作用及其酒精代谢的影响1.酒速愈预防性给药对急性酒精中毒小鼠醉酒时间、醉酒率的影响健康昆明种小鼠，雌雄各半，随机分为4组：模型组(灌服等容积生理盐水)、酒速愈低剂量组(灌服酒速愈16.2g生药/Kg体重)、酒速愈高剂量组(灌服酒速愈32.4g生药/Kg体重)、葛花解酲汤组(灌服葛花解酲汤13.1g生药/Kg体重)，每组20只。各组小鼠禁食12h，各治疗组均一次性给药，30min后4组均以14ml/Kg体重56°红星二锅头酒灌胃。观察记录小鼠醉酒时间(从清醒到翻正反射消失的时间)，计算24h内的醉酒率。小鼠醉酒与否以翻正反射是否消失为标准：小鼠灌酒后将其背向下轻轻放入鼠笼，若小鼠背向下的姿势保持30秒以上，则认为翻正反射消失，即为醉酒。 2.酒速愈治疗性给药对急性酒精中毒小鼠醒酒时间和死亡率的影响动物分组、用药情况同前，每组20只。各组小鼠禁食12h后，均以16ml/Kg体重56°红星二锅头酒灌胃，30min后各治疗组分别一次性给药，模型组灌服等容积生理盐水。观察记录小鼠醒酒时间(从翻正反射消失到清醒的时间)，计算24h内的死亡率。 3.酒速愈治疗性给药对急性酒精中毒小鼠血清乙醇浓度和肝组织和胃组织ADH活性的影响小鼠随机分为5组：正常组、模型组(灌服等容积生理盐水)、酒速愈低剂量组(灌服酒速愈16.2g生药/Kg体重)、酒速愈高剂量组(灌服酒速愈32.4g生药/Kg体重)、葛花解酲汤组(灌服葛花解酲汤13.1g生药/Kg体重)，每组16只。各组小鼠禁食12h，除正常组外，均以14ml/Kg体重56°红星二锅头酒灌胃，30min后各治疗组分别给药，模型组灌服等容积生理盐水。6h后，眼眶取血并处死小鼠，立即剖取肝脏和胃。肝脏去包膜，胃去内容物并经预冷的生理盐水反复冲洗干净，滤纸吸干、称重，按1∶10加入预冷的1.15％氯化钾溶液分别制成肝、胃组织匀浆。 参照文献方法测定肝组织、胃组织ADH活性和血清乙醇浓度。ADH活性以每1g组织每1min生成的ADH的nmol数表示。 数据采用均数±标准差(-x±s)表示，用SPSSforWindows11.5统计软件处理，多组比较先采用单因素方差分析，然后用Student-NewmanKeulsTest进行每两组间比较，显著性差异水平以0.05和0.01为标准。 第二部分：酒速愈对急性酒精中毒小鼠氧化损伤的影响动物分组、用药情况、模型复制以及数据统计方法同乙醇浓度检测。D活性，组织 第三部分：酒速愈对急性酒精中毒小鼠胃粘膜的保护作用研究动物分组、用药情况、模型复制以及数据统计方法同第二部分。给药6h后断头，剖腹取胃，沿胃大弯剪开，生理盐水漂洗，滤纸吸干，先肉眼观察胃粘膜的大体情况，再剪取部分胃窦组织，4％多聚甲醛固定，HE染色，光镜下观察胃粘膜的病理组织学的变化；刀片刮取其余胃粘膜组织并称重，冰浴下制备10％组织匀浆，3000r/min离心15min，取上清，-20℃以下保存，留作NO、ET-1、TNF-α、IL-8、PGE2检测(小鼠分批取材检测)。用硝酸还原酶法测定胃粘膜NO含量；用放射免疫法测定ET-1、TNF-α、IL-8、PGE2含量，并用蛋白含量校正。 第四部分：酒速愈对急性酒精中毒小鼠肝脏的保护作用研究动物分组、用药情况、模型复制以及数据统计方法同第二部分。 第五部分：酒速愈对急性酒精中毒小鼠脑神经递质的影响动物分组、用药情况、模型复制以及数据统计方法同第二部分。给药1h后断头处死小鼠，在冰浴中迅速取脑，剥离海马及纹状体。采用荧光分光光度法测定纹状体内DA、5-HT含量；用化学比色法测定脑海马AchE含量。 结论1.酒速愈治疗急性酒精中毒的疗效确切，可明显降低小鼠醉酒率、死亡率，延长醉酒时间，缩短醒酒时间，具有显著的解酒促醒作用，并可升高急性酒精中毒小鼠肝、胃组织的ADH活性，降低血清乙醇浓度。 2.酒速愈能显著升高模型小鼠血清、胃粘膜、脑组织、肝组织SOD活性，降低MDA含量，具有抑制脂质过氧化反应，抗氧化作用，通过调节和改善自由基代谢，减轻急性酒精中毒的氧化损伤。 3.酒速愈可降低急性酒精中毒模型小鼠胃粘膜的ET-1含量，提高NO含量，通过调节二者的比例，改善胃粘膜微循环，促进局部血流供应，从而减轻急性酒精中毒时胃粘膜损伤。 4.酒速愈可降低急性酒精中毒模型小鼠胃粘膜TNF-α、IL-8炎性介质的含量，并能升高胃粘膜PGE2含量，通过减少炎性介质，加强胃粘膜的粘液——碳酸氢盐屏障，从而减轻急性酒精中毒时胃粘膜的损伤。 5.酒速愈可降低急性酒精中毒模型小鼠肝组织中TNF-α、IL-8炎性介质的含量，通过减少炎性介质，减轻急性酒精中毒时肝脏的损伤，并可显著降低血清中AST、ALT活性，对肝脏具有保护作用。 6.酒速愈可降低急性酒精中毒模型小鼠脑纹状体中单胺类神经递质DA和5-HT和海马AchE的含量，通过调节脑组织神经递质的含量，改善醉酒时嗜睡、激动等神经行为学异常，减轻急性酒精中毒对神经系统的损伤。

目录

摘要

英文缩写

引言

第一部分酒速愈对急性酒精中毒小鼠解酒促醒作用及其酒精代谢的影响

第二部分酒速愈对急性酒精中毒小鼠氧化损伤的影响

第三部分酒速愈对急性酒精中毒小鼠胃粘膜ET-1、NO、TNF-α、IL-8、PGE2及病理形态学的影响

第四部分酒速愈对急性酒精中毒小鼠血清AST、ALT以及肝组织TNF-α、IL-8的影响

第五部分酒速愈对急性酒精中毒小鼠脑神经递质的影响

结论

综述 急性酒精中毒的损伤机制及中药防治酒精性损害的实验研究概况

致谢

个人简历