外源性雌二醇对去势雌性Wistar大鼠晶状体上皮ERα、ERβ和Survivin表达的影响

摘要

目的:白内障是各种原因引起的晶状体的混浊。白内障一直是公认的首要致盲眼病,我国目前盲人中约有半数是白内障引起的。白内障是世界范围内的严重公共卫生、社会和经济问题,是防盲治盲工作最优先考虑的眼病。
　　 导致白内障的因素多种多样,例如,老化、遗传、代谢异常、外伤、辐射、中毒和局部营养障碍等。这些因素可引起晶状体上皮细胞及囊膜损伤,渗透性增加,丧失屏障作用,晶状体蛋白变性,纤维结构改变,形成混浊。近些年,许多大型流行病学调查均发现雌激素可保护晶状体透明性,预防晶状体混浊,对晶状体有一定的保护作用。但雌激素抑制白内障发生的机制尚不十分清楚。实验研究初步表明雌激素可能通过抗氧化损伤、维持细胞膜正常功能、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)介导、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、凋亡等途径发挥作用。对雌激素抑制白内障机制的进一步研究将有助于从新的角度揭示白内障形成的深层次机制,为防治白内障提供新的手段,具有重要的社会效益和经济效益。
　　 本实验把成年去势雌性Wistar大鼠随机分组,分别通过点眼或注射的方法给予不同剂量的雌二醇(estradiol,E2),观察其对晶状体的透明性,光镜下的形态和上皮细胞雌激素受体Erα、Erβ及凋亡相关基因Survivin表达的影响,发现雌二醇不同剂量和不同给药途径之间对晶状体性状和基因表达影响的差别,为探索雌二醇抑制白内障的机制提供理论基础和实验依据。
　　 方法:
　　 将60只清洁级健康成年雌性性成熟Wistar大鼠随机分为6组:
　　 A组.正常对照组(给予假手术,不给予雌二醇干预)
　　 B组.去势组(给予双侧卵巢切除,不给予雌二醇干预)
　　 C组.去势+低浓度E2点眼组(双侧卵巢切除后,给予苯甲酸雌二醇注射液50％稀释液点眼,每日4次)
　　 D组.去势+高浓度E2点眼组(双侧卵巢切除后,给予苯甲酸雌二醇注射液原液点眼,每日4次)
　　 E组.去势+低剂量E2注射组(双侧卵巢切除后,给予苯甲酸雌二醇注射液0.200mg.Kg-1.次-1肌肉注射,每3天一次)
　　 F组.去势+高剂量E2注射组(双侧卵巢切除后,给予苯甲酸雌二醇注射液0.400mg.Kg-1.次-1肌肉注射,每3天一次)
　　 术前、术后及给药后每周肉眼和裂隙灯显微镜观察各组大鼠晶状体变化。
　　 观察6周后用放免法检测血清中雌二醇浓度并处死大鼠,取其晶状体分别进行光镜下组织细胞的形态观察,免疫组化SP法观察雌激素受体Erα、Erα及凋亡相关基因Survivin在晶状体上皮细胞的表达。实验数据用((-X)±S)表示,应用SPSS13.0统计软件进行统计处理。
　　 结果:
　　 1、肉眼及裂隙灯显微镜下观察,各组大鼠晶状体均未出现空泡、小水裂以及前囊点状混浊等改变。
　　 2、光镜下,各组大鼠晶状体囊膜均匀连续,上皮细胞排列紧密,晶状体纤维均未出现空泡、小水裂等改变。
　　 3、给药6周后,去势+低浓度E2点眼组(C组)、去势+高浓度E2点眼组(D组)与去势组(B组)无差别(P＞0.05)。去势+低剂量E2注射组(E组)和去势+高剂量E2注射组(F组)血清雌二醇平均水平明显高于B组(P＜0.01)。
　　 4、去势组(B组)的Erα、Erβ免疫反应阳性细胞率(rate)及OD值较正常对照组(A组)明显下降(P＜0.01)。去势+低浓度E2点眼组(C组)、去势+高浓度E2点眼组(D组)和去势+高剂量E2注射组(F组)Erα、Erβ免疫反应阳性细胞的表达较去势组(B组)明显增高(P＜0.01)。去势+低剂量E2注射组(E组)Erα、Erβ免疫反应阳性细胞的表达较去势+高剂量E2注射组(F组)下降(P＜0.01)。去势+低浓度E2点眼组(C组)、去势+高浓度E2点眼组(D组)和去势+高剂量E2注射组(F组)间无明显差别(P＞0.05)。
　　 5、Survivin在正常对照组(A组)、去势组(B组)、去势+低浓度E2点眼组(C组)和去势+低剂量E2注射组(E组)未见表达。去势+高浓度E2点眼组(D组)和去势+高剂量E2注射组(F组)可见晶状体上皮细胞Survivin阳性表达。
　　 结论:
　　 1.晶状体上皮细胞Erα和Erβ的表达水平与体内雌激素的水平有关。雌激素对晶状体的保护作用是通过雌激素受体产生。
　　 2.晶状体上皮细胞Survivin的表达水平由体内高水平的外源性雌激素引起。雌激素具有诱导Survivin表达的作用。
　　 3.雌激素的不同给药途径对晶状体的影响不同。低剂量雌激素点眼优于其它雌激素给药方式。

目录

文摘

英文文摘

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:雌激素与晶状体的研究进展

致谢

个人简历