用cDNA微阵列技术筛选并鉴定与水稻白叶枯病抗性相关的差异表达基因的cDNA克隆

摘要

该研究用cDNA微阵列技术,经Northern杂交证实,筛选到在SL3751和13751平行接种诱导下感病水稻金铡30分蘖前苗期的10个差异表达基因的cDNA克隆,对其中4个差异表达克隆中的外源cDNA片段测序分析发现,这4个克隆中含有4个基因:细胞色素b5基因、水孔素基因、25SrRNA和与拟南芥一个推断蛋白基因同源基因.除25SrRNA基因的cDNA,基余3个差异表达基因的cDNA均为全长.与13751和对照接种诱导处理相比,在SL3571接种诱导的水稻体内,细胞色素b5基因表达水平低于13751诱导处理,但高于对照处理下的表达水平.

目录

摘要

第一篇前言

第一章植物抗病性研究现状及进展简介

1.1植物抗病类型

1.2植物抗病机制

1.3病原菌致病相关基因及植物抗病相关基因

第二章植物病害的防治策略简介

2.1化学防治

2.2抗病品种培育

2.3潜在的防治方法

第三章水稻白叶枯病的研究现状及防治方法

3.1发生概况

3.2病抗性基因

3.3防治方法

第四章DNA芯片技术

4.1发展及简介

4.2技术要点

4.3应用研究现状

4.4国内外同类技术的开发应用简况

4.5 DNA芯片制作和使用技术路线图解

第五章本研究工作的目的及意义

第二篇材料与方法

第一章材料

1.1供试菌株与质粒

1.2水稻品种

1.3培养基、生长条件及菌株保存

1.4抗生素及其使用浓度

1.5溶液与缓冲液

第二章方法

2.1水稻接种及其组织材料的采集处理

2.2 RNA操作

2.3 cDNA芯片的制作

2.4 cDNA芯片的使用

2.5 DNA操作

2.6 DNA测序

第三篇结果

3.1待测水稻组织总RNA及mRNA

3.2水稻明恢63全生育期平衡cDNA文库的cDNA微阵列

3.3水稻金刚30在分蘖前苗期的基因差异表达显示及侯选差异表达的cDNA克隆

3.4侯选差异表达的cDNA克隆的杂交证实

3.5差异表达的cDNA片段的测序分析

第四篇分析与讨论

4.1细胞色素b5基因与水稻白叶枯病抗性

4.2水孔素基因与水稻白叶枯病抗性

4.3 25SrRNA基因与水稻对白叶枯病的抗性

4.4与乙烯效应因子结合蛋白基因同源基因与水稻白叶枯病抗性

4.5其它与水稻白叶枯病抗性相关的基因

4.6本研究的结论

第五篇本研究存在的问题及进一步研究设想

5.1存在问题

5.2进一步研究设想

参考文献

致谢