痤疮患者痤疮丙酸杆菌的抗生素敏感性分析及临床研究

摘要

目的： 寻常痤疮是一种累及毛囊皮脂腺的慢性炎症性疾病，各年龄段人群均可患病，但以青少年发病率为高。痤疮丙酸杆菌（P.acnes）是痤疮发病的诱因之一，其在毛囊皮脂腺内定植、诱发免疫反应可形成及加重痤疮皮损。性别、年龄、饮食、生活习惯、病程长短和治疗史等可影响痤疮的严重程度及痤疮丙酸杆菌的药敏情况。随着抗生素的广泛应用，痤疮丙酸杆菌对许多抗生素产生了耐药，且存在地区差异。本研究旨在通过纳入痤疮患者，分离培养丙酸杆菌临床株，并对其进行临床上常用的11种抗生素的体外药敏试验，了解本地区痤疮患者痤疮丙酸杆菌的耐药情况及痤疮丙酸杆菌的检出率和耐药与临床的关系，为医师临床用药提供理论依据。 方法： 收集2015年6月～2016年10月暨南大学医学院附属东莞医院皮肤科门诊就诊符合寻常痤疮诊断标准的212例痤疮患者，采集患者的粉刺、丘疹和脓疱等内容物，接种到厌氧血琼脂平板，置于厌氧环境中培养48h，再进行传代纯化培养48h后，将纯化的菌落放置在-70℃冰箱保存。菌株采用法国梅里埃VITEK MS plus进行质谱鉴定。应用琼脂稀释法对156株痤疮丙酸杆菌进行11种抗生素的体外药敏试验（四环素、多西环素、米诺环素、红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、克林霉素、头孢曲松钠、左氧氟沙星、甲硝唑、复方新诺明），数据采用软件SPSS19.0进行统计分析。 结果： 1.本研究纳入患者212人，年龄11～45岁，平均年龄（21.2±5.65）岁，男性122例、女性90例。平均发病年龄（18.4±5.29）病程1个月～26年，平均病程（2.45±2.75）年。其中青春期痤疮（年龄＜25岁）男110例，女58例；青春期后痤疮（年龄≥25岁）男12例，女32例，青春期痤疮与青春期后痤疮的患者性别差异有统计学意义，青春期痤疮男性多于女性，青春期后痤疮女性多于男性。持续性青春期后痤疮24例，男7例，女17例，患病率54.5%（24/44）；迟发型青春期后痤疮20例，男5例，女15例，患病率45.0%（20/44）。两种青春后期痤疮的发病与性别无统计学意义。 2.212例患者分离培养得到临床株228株，经质谱仪鉴定结果：156株痤疮丙酸杆菌，40株表皮葡萄球菌，10株颗粒丙酸杆菌，5株贪婪丙酸杆菌，4株头状葡萄球菌，2株金黄色葡萄球菌、2株产气肠杆菌、2株结核硬质膜杆菌、1株嗜冻菌、1株肺炎克雷伯菌、1株蜡样芽孢杆菌、1株产气芽孢杆菌、1株人型葡萄球菌、1株毗邻颗粒杆菌、1株口腔链球菌。 3.本研究纳入痤疮患者男122人，女90人，男性检出91株（74.6%），女性检出65株（72.2%），性别与P.acnes的检出之间无统计学意义。本研究中青春期痤疮168例，P.acnes检出123例（73.2%）；青春期后痤疮44例，P.acnes检出32例（72.7%）,两年龄段P.acnes检出率无统计学差异。本研究按照Pillsbury分类法可分为四度，痤疮分度及P.acnes的检出之间的关系经统计学分析差异无统计学意义。212例痤疮患者中，病程＜2年91例，检出P.acnes67例；病程≥2年121例，检出P.acnes89例，两者差异无统计学意义。 4.156株痤疮丙酸杆菌的抗生素药物敏感性试验，结果示耐药性从高到低依次为：甲硝唑100%（156/156）、复方新诺明100%（156/156）、克拉霉素83.9%（131/156）、阿奇霉素48.7%（76/156）、红霉素30.1%（47/156）、克林霉素28.9%（45/156）、左氧氟沙星5.1%（8/156）、头孢曲松钠0%（0/156）、四环素0%（0/156）、多西环素0%（0/156）、米诺环素0%（0/156）。11种抗生素除了四环素、多西环素、米诺环素和头孢曲松钠100%敏感以及甲硝唑和复方新诺明100%耐药之外，还发现部分菌株对剩余5种抗生素（红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、克林霉素、左氧氟沙星）产生了多重耐药，单一、二重、三重、四重、五重耐药率分别是：39.1%（61/156）、19.2%（30/156）、32.1%（50/156）、21.8%（34/156）、3.8%（6/156）。 5.由于大环内酯类和林克酰胺类抗生素间存在高度交叉耐药，并且P.acnes对这两类药物耐药机制相似，为便于统计，本研究将三种大环内酯类抗生素（红霉素、阿奇霉素和克拉霉素）与林克酰胺类抗生素（克林霉素）耐药情况归为一大类统计，用MLS表示。对MLS耐药：男性79例，女性60例，二者差异无统计学意义；对左氧氟沙星耐药：男性5人，女性2人，二者差异无统计学意义。年龄＜25岁的患者对MLS耐药108例，≥25岁的患者对MLS耐药31例，二者差异无统计学意义。＜25岁的患者对LVX耐药6例，≥25岁的患者对左氧氟沙星耐药1例，二者差异无统计学意义。病程＜2年的患者对MLS耐药61例，病程≥2年的患者对MLS耐药78例，二者差异无统计学意义。病程＜2年的患者对左氧氟沙星耐药3例，病程≥2年的患者对左氧氟沙星耐药4例，二者差异无统计学意义P.acnes MLS耐药与痤疮分度，统计无显著性差异；P.acnes对左氧氟沙星耐药与痤疮分度，统计无显著性差异。 结论： 212例痤疮患者经统计分析青春期痤疮与青春期后痤疮的患者性别差异有统计学意义，青春期痤疮男性多于女性，青春期后痤疮女性多于男性。痤疮皮损内容物在厌氧环境下培养出228株细菌，经VITEK MS plus质谱仪鉴定有156株痤疮丙酸杆菌，40株表皮葡萄球菌，10株颗粒丙酸杆菌，5株贪婪丙酸杆菌，4株头状葡萄球菌，2株金黄色葡萄球菌及11株其它杂菌。痤疮丙酸杆菌在痤疮的发病中起到重要作用，痤疮丙酸杆菌的检出与患者的性别、年龄、病程和痤疮的临床分度均无统计学意义。156株痤疮丙酸杆菌的抗生素药物敏感性试验，结果示耐药性从高到低依次为：甲硝唑100%、复方新诺明100%、克拉霉素83.9%、阿奇霉素48.7%、红霉素30.1%、克林霉素28.9%、左氧氟沙星5.1%、头孢曲松钠0%、四环素0%、多西环素0%、米诺环素0%。11种抗生素除了四环素、多西环素、米诺环素和头孢曲松钠100%敏感以及甲硝唑和复方新诺明100%耐药之外，还发现部分菌株对剩余5种抗生素（红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、克林霉素、左氧氟沙星）产生了多重耐药。痤疮丙酸杆菌的耐药与患者的性别、年龄、病程和痤疮的临床分度均无统计学意义。

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