应用参考方法实现常规生化12个项目测量结果标准化的探讨

摘要

目的:
　　使用参考测量方法和新鲜冰冻血清评估广州市21家临床实验室12项常规生化项目测量结果的正确度及其溯源性能否满足临床需要。用参考方法赋值的新鲜冰冻血清校准常规检测系统后观察检测系统能否实现测量结果的标准化和一致性。
　　方法:
　　1、对新鲜冰冻血清样本的均匀性和稳定性进行评价。
　　2、2家参考实验室按照IFCC推荐的方法建立丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、尿素(Urea)、尿酸(UA)、肌酐(CR)、乳酸脱氢酶(LDH)、淀粉酶(AMY)、肌酸激酶(CK)、总胆红素(TBIL)和葡萄糖(GLU)测定的国际标准化参考方法，并以这2家参考实验室测量结果的均值作为参考靶值。
　　3、将5份不同浓度的新鲜冰冻血清和5份不同浓度的冻干粉样本分发给21家参加实验室，并计算所有实验室测量结果的均值作为均值靶值。对21家实验室的常规检测系统进行正确度的评估。
　　4、针对GGT项目中新鲜冰冻血清标本表现出的偏移大于冻干粉，选取其中比较明显的某一实验室进行基质效应评价。
　　5、参加中国合格评定国家认可委员会组织的临床试验，12个生化项目分别发放1份新鲜冰冻血清校准品和2份不同浓度的新鲜冰冻血清。5家参考实验室均值为这些新鲜冰冻血清样本进行赋值，广州市21家临床实验室参与测量，分别对新鲜冰冻血清校准品校准常规检测系统前后各测量此3份样本，与参考靶值进行比较，并计算偏移。
　　结果:
　　1、均匀性实验发现新鲜冰冻血清的12个项目的5个不同浓度标本的测量结果的P值均大于0.05，表明制备的样本间无统计学意义，另外样本的均匀性不确定度均小于相应的方法重复性测量的不确定度，表示制备的新鲜冰冻血清的均匀性良好。稳定性实验中除了CK项目中的样本1在第6个月和样本4在第20个月以及AMY项目的样本1在第20个月外，其余项目的样本均在20个月的观察期内没有出现明显波动。
　　2、大部分项目(76.92％)表现出浓度相关性，即随着浓度的增加偏移变小，但CK、Cr和LDH项目在超出参考范围一定浓度时，这种规律消失。针对新鲜冰冻血清，参考靶值与均值靶值之间的相对偏倚较大的项目有ALP（-13.17％～-10.95％），GGT（-6.23％～-4.31％），TBIL（-6.23％～0.89％）和AMY（-10.47％～-6.63％）;针对冻干粉样本，参考靶值与均值靶值之间的相对偏倚较大的项目有ALT（-4.06％～18.63％),AST(-10.96％～-6.43％),ALP(-8.55％～14.10％),CK(-3.79％～11.80％),Urea(-5.77％～19.48％), TBIL(-14.24％～13.89％), Cr(3.20％～10.12％), LDH(-5.76％～20.45％),AMY(-2.40％～13.56％)。GGT（-6.23％～-4.31％），TBIL（-6.23％～0.89％）和AMY（-10.47％～-6.63％）;无论对于新鲜冰冻血清样本还是冻干粉样本，使用参考靶值实验室的合格比率小于使用均值靶值实验室合格比率的项目为GGT，另外针对冻干粉样本来说，参考靶值与均值靶值之间的偏移比新鲜冰冻血清样本偏大，而且涉及项目较多。使用适宜生物学变异准则要比使用1/2CLIA'88准则要严格，主要表现在以下几个项目:AST、ALP、UA、GLU、LDH、AMY和Cr。
　　3、基质效应实验5种不同浓度冻干粉样本结果全部落在95％区间外，故认为在此实验室常规测系统上这些全部表现出正基质效应。
　　4、针对样本1样本，有些项目的实验室合格率不足80％。如以1/2CLIA'88为判断标准，ALT项目的合格率为33.33％和TBIL的合格率为47.62％等，以生物学变异为判断标准，AST项目的合格率仅为为14.19％，ALP为38.10％，Cr为38.10％，AMY为42.86％，TBIL位47.62％以及GLU为38.10％。校准后各个实验室的12项目项目的系统偏移都有大幅度降低，各项目的合格率都有所提高，有的项目甚至全部符合要求，如GGT。但仍有部分项目的部分实验室校准后偏移增加，例如LDH项目有7家实验室，GLU项目为8家。待评样本2（浓度2），校准前，使用CLIA'88判断准则实验室合格率均高于50％。使用生物学变异适宜准则实验室合格率低于50％的项目有AST(28.57％)、ALP(23.81％)、AMY(47.62％)、Cr(47.62％)、LDH(33.33％)和GLU(19.05％)。校准后，各项目的合格率都有所提高，GGT、AMY和LDH全部符合要求。但仍有部分项目的部分实验室校准后偏移增加，例如ALT项目有5家实验室，TBIL项目为8家实验室，UA项目为7家实验室。
　　结论:
　　1、实现临床检验结果准确可比始终是实验室必须面对的问题，检验结果的准确性有待进一步提高。
　　2、相比使用冻干粉和均值靶值，使用新鲜血清和参考靶值可以更好的评估测量结果的准确度。
　　3、使用新鲜冰冻血清作为校准品，在一定程度上能够改善不同检测系统针对同一被测量的测量结果多样化的局面，从而实现临床检验测量结果的标准化。

目录

声明

摘要

引言

第一章 广州市21家医院常规生化检测项目正确度的调查与探究

1 材料与方法

1．1 仪器

1．2 样本收集

1．3 样本均匀性和稳定性验证

1．4 样本赋值

1．5 基质效应评价

1．6 统计学处理

2 结果

2．1 均匀性评价

2．2 稳定性评价

2．3 靶值确定

2．4 临床实验室测量结果的相对偏移

2．5 基质效应评估

3 讨论

第二章 新鲜冰冻血清校准品对实现常规生化结果标准化的影响

1 材料与方法

1．1 仪器

1．2 样本收集

1．3 样本复融

1．4 参考实验室赋值

1．5 临床实验室测量

1．6 数据处理

2 结果

2．1 靶值确定

2．2 校准前后样本1样本的检测结果

2．3 校准前后浓度2样本的检测结果

3 讨论

结语

参考文献

综述 常规生化测量结果标准化和一致化的研究与探讨

附录

在校期间发表论文情况

致谢