重离子辐照对CAL-27细胞的影响及其miRNA表达谱的生物信息学分析

摘要

目的：通过不同的辐射源(X射线及重离子)，初步探讨在相同剂量下，重离子辐照对人舌鳞癌CAL-27细胞生物学效应的影响，并进一步分析microRNA(miRNA)表达谱的变化，为肿瘤的放射治疗打下一定理论基础。
　　方法：利用X射线仪器及12C6+离子束辐照人舌鳞癌CAL-27细胞，通过细胞克隆成形实验检测细胞存活率；应用流式细胞术实验检测细胞凋亡率。运用高通量测序技术进行测序，分析受辐照细胞miRNA表达谱的变化，并对其靶基因进行代谢通路富集分析,以探讨其损伤机理。
　　结果：1).Control、X08和R08组细胞克隆存活率分别为(100±0.031)％、(93±0.031)％、(64±0.027)％(P＜0.05)，细胞凋亡率分别为1.9%、13.9%、30.4%(P＜0.05)。2).受重离子辐照组细胞共有33个已知miRNAs表达差异，其中有12个miRNAs表达上调(如hsa-miR-629-5p，hsa-miR-146b-5p及hsa-miR-15b-5p等)，21个miRNAs表达下调（如hsa-miR-181a-2-3p，hsa-miR-130a-3p，hsa-miR-181a-3p等）；4个未知miRNAs表达差异(Novel-mir-519,Novel-mir-797,Novel-mir-577及Novel-mir-624)。3).针对表达差异的已知miRNAs通过KEGG数据库筛选出了15条表达差异的信号通路。如嗅觉传导通路、细胞因子受体交互通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路等(p<0.05)。
　　结论：在相同剂量下，相比于X射线,重离子辐照对人舌鳞癌CAL-27细胞株的生物学效应影响较大，其中miRNA表达谱的变化机理可能与MAPK信号传导通路有关，这将为研究相关miRNA在人舌鳞癌放射治疗中的分子生物学机理打下一定理论基础。

目录

声明

中英文缩略词表

第一章 研究背景

1 放射治疗

第二章 重离子束与X射线辐照对CAL-27细胞存活的影响

1 材料与方法

2 细胞克隆实验

3 结果与结论

第三章 重离子束与X射线辐照对CAL-27细胞凋亡的影响

1 材料与方法

2 流式细胞术实验

3 结果与结论

第四章 重离子束与X射线辐照对CAL-27细胞miRNA表达谱的影响

1 材料与方法

第五章 全文总结

1 重离子辐照CAL-27细胞后表达差异的miRNA

2 重离子辐照对MAPK信号通路的影响

参考文献

在学期间的研究成果

致谢

附录—病例汇报

病例一、不良修复体再修复

病例二、上前牙美学修复