过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-α调节CD4+T淋巴细胞亚群Th17细胞分化的机制研究

摘要

目的:核激素受体家族中的过氧化物酶体增殖激活受体(peroxisomeproliferators-activated receptor，PPARα)主要参与脂质和糖类代谢的调节过程;PPARα也在T淋巴细胞的免疫反应中发挥重要作用。研究表明PPARα可以调控Th1/Th2细胞的分化程度，但对Th17细胞分化的调节尚不清楚。因此，本课题拟通过利用PPARα基因敲除细胞模型，阐明PPARα在Th17细胞分化中的作用及其分子机制。
　　方法:体外培养野生型小鼠(PPARα+/+)及PPARα敲除小鼠(PPARα-/-)的CD4+T细胞，CD3/CD28共刺激活化CD4+T细胞;应用流式细胞术、Real-time PCR、ELISA、Western Blotting等方法检测分析PPARα敲除对Th17细胞分化的相关细胞因子及核内转录因子的影响，并明确其对Th17细胞分化调节的信号通路。
　　结果:CD4+T细胞体外实验结果显示，PPARα基因敲除可以显著促进Th17细胞的分化，而激活PPARα抑制了Th17细胞的分化，表明了PPARα在Th17细胞分化中扮演重要角色。进一步研究发现，PPARα基因敲除促进了IL-6/STAT3信号通路的传导，分别阻断IL-6和STAT3逆转了PPARα基因敲除对Th17细胞分化的影响;PPARα基因敲除促进IKB-ζ的表达而激活PPARα可以抑制IKB-ζ的表达，提示了PPARα可能通过调节IKB-ζ的表达从而参与Th17细胞的分化;PPARα基因缺失可以显著增加mTOR/HIF1α的表达，进一步阻断其信号传导也显著抑制了Th17细胞的分化，但野生型和PPARα敲除型未见明显的差异。
　　结论:通过上述实验我们明确了PPARα在Th17细胞的分化中发挥重要作用;PPARα可能通过调节IL-6/STAT3信号通路及IKB-ξ的表达而参与Th17细胞的分化。

目录

声明

摘要

第一章 前言

1．1 PPARs概述

1．1．1 PPARs简介

1．1．2 PPARα的简介

1．2 CD4+T淋巴细胞

1．3 Th17细胞的研究进展

1．4 Th17细胞分化的相关信号通路

1．4．1 IL-6／STAT3信号通路

1．4．2 IKB-ζ信号通路

1．4．3 mTOR信号通路

1．5 PPAR与Th17细胞在某些自身免疫性疾病中的相互作用

1．6 研究内容

第二章 材料及方法

2．1 实验动物

2．2 实验试剂

2．3 仪器与耗材

2．4 实验方法

2．4．1 脾细胞的提取和培养

2．4．2 CD4+T细胞的提取和培养

2．4．3 流式细胞术

2．4．4 RNA的提取

2．4．5 蛋白的提取

2．4．6 ELISA检测分析

第三章 结果与分析

3．1 PPARα在Th17细胞分化中的作用

3．1．1 PPARα基因敲除促进Th17细胞分化

3．1．2 激活PPARαQ抑制Th17细胞的分化

3．2 PPARα调节Th17细胞分化的分子机制

3．2．1 IL-6／STAT3信号通路在PPARα调节Th17分化中的作用

3．2．2 IKB-ζ在PPAR-α调节Th17分化中的作用

3．2．3 mTOR／HIF1α信号通路在PPAR-α调节Th17分化中的作用

第四章 讨论与展望

4．1 讨论

4．2 展望

第五章 结论

附录

参考文献

致谢