JAK2/STAT3信号通路介导粒细胞集落刺激因子影响冠状动脉微栓塞后心肌细胞凋亡的实验研究

摘要

微栓塞是冠状动脉无复流的主要原因，是急性冠脉综合征(ACS)及经皮冠状动脉介入治疗(PCI)中十分常见且重要的临床病理过程[1]，减少冠状动脉微栓塞(CME)的发生以及改善CME引起的心肌细胞损伤具有重要的临床意义。为此，我们利用大鼠自体微栓塞模型，通过CME后心肌细胞凋亡调控基因、凋亡执行蛋白表达的改变以及血流动力学检测，探讨(1)CME对心肌细胞凋亡及左心室功能的影响。(2)粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对冠脉微栓塞心肌细胞凋亡的影响及其细胞内信号传导机制。 一、冠状动脉微栓塞对心肌细胞凋亡及左心室功能的影响目的：探讨冠脉微栓塞对大鼠心肌细胞凋亡及左心室功能的影响。方法：采用清洁级健康雄性SD大鼠56只，体重280～320g。随机分为假手术组(Sham组n=24)和微栓塞组(CME组n=32)；根据不同观察时间点再分为术后3d(天)、7d、14d及28d四个亚组，每亚组6-8只。CME组夹闭升主动脉同时自左室腔注入自体微血栓混悬液，Sham组则注入等容量的生理盐水。采用HE及Masson染色观察心肌组织病理学改变；Real-time PCR及免疫组化检测心肌细胞Bcl-2、Bax、Fas、Fas-L等凋亡调控基因mRNA及其蛋白的表达；采用Western blot方法检测Caspase3、Caspase9和裂解PARP蛋白的表达；应用超声心动图及有创血液动力学检测大鼠左心功能的变化。 结果：(1)HE染色显示CME术后可见心内膜下多中心小灶性心肌缺血、坏死伴白细胞浸润。Masson染色显示CME后心肌微小纤维灶形成，且多分布于心内膜区。(2)与Sham组相比较，CME组术后Bax、Fas及Fas-L mRNA及其蛋白的表达水平明显增高，Bc1-2/Bax的比值明显降低(7d：0.18±0.04 vs 2.98±0.49)，术后7d达高峰(P<0.01)。(3)CME组Caspase-3、Caspase-9及裂解PARP蛋白表达明显高于Sham组，同样在术后7d达高峰(P<0.01)。(4)CME组凋亡指数较Sham组明显增高(7d：17.2±1.9 vs 1.2±0.6)(P<0.01)；LVEF、LVSP及±dp/dtmax较sham组明显降低(P<0.01)。结论：冠脉微栓塞早期即可通过改变凋亡调控基因的平衡，启动、激活Caspase级联反应，促进心肌细胞凋亡，降低左室功能。

目录

论文说明：英文缩略词表

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摘要

前 言

第一部分冠状动脉微栓塞对心肌细胞凋亡及左心室功能的影响

第二部分粒细胞集落刺激因子对冠脉微栓塞心肌细胞凋亡的影响

第三部分JAK2/STAT3通路在G-CSF减轻冠状动脉微栓塞心肌细胞凋亡中的介导作用

全文总结

参考文献

动员骨髓干细胞治疗心肌梗死的研究现状(综述)

致 谢