青天葵及其组织培养物生药鉴别和体外抗乙型肝炎病毒实验研究

摘要

目的：对青天葵及其组织培养物进行化学成分预试和紫外光谱分析，并比较其异同，为青天葵质量标准研究提供生药鉴别依据；对青天葵及其组织培养物和组织培养物各提取部位进行体外抗乙型肝炎病毒药效学研究；初步判断组织培养物是否能作为青天葵资源加以利用。 方法：采用化学成分预试方法来检识青天葵及其组织培养物所含化学成分类型并比较其异同；采用紫外光谱线组法以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水为溶剂，测定青天葵及其组织培养物紫外吸收，比较两者吸收特征；以2.2.15细胞为模型，加入药物培养8d，显微镜下观察细胞形态，结合MTT法确定最大无毒浓度；用酶联免疫法(ELISA法)检测青天葵水提液、青天葵组织培养物水提液和青天葵组织培养物各提取部位对2.2.15细胞分泌的e抗原(HBeAg)和表面抗原(HBsAg)抑制作用。结果：化学成分预试表明青天葵及其组织培养物均含有氨基酸、多肽、蛋白质、有机酸等成分，所不同的是青天葵含有黄酮、酚、香豆素、内酯、强心苷、植物甾醇和三萜类成分，组织培养物含有皂苷类成分，特征性强，可作为二者生药鉴别方法。 青天葵石油醚提取液在223.0nm、270.0nm、287.0nm有吸收峰，乙酸乙酯提取液在267.0nm、270.0nm、320.0nm有吸收峰，正丁醇提取液在223.0nm、255.0nm、262.0nm有吸收峰，水提取液紫外无吸收。青天葵组织培养物石油醚提取液在222.0nm、272.0nm有吸收峰，乙酸乙酯提取液在270.0nm、276.0nm、285.0nm有吸收峰，正丁醇提取液在223.0nm、262.0nm有吸收峰，水提取液在258.0nm、361.0nm、394.0nm有吸收峰。二者石油醚提取液在223.0±1.0nm和270.0±2.0nm、乙酸乙酯提取液在270.0nm、正丁醇提取液在223.0nm和26.0nm有相同吸收峰，青天葵水提取液紫外无吸收，而组织培养物水提取液紫外有吸收。紫外光谱特征性强，也可作为二者生药鉴别方法。 青天葵水提液对HBeAg和HBsAg均具有抑制作用，对HBeAg抑制作用强于对HBsAg抑制作用；青天葵组织培养物水提液对HBeAg和HBsAg均具有抑制作用，对HBsAg抑制作用强于对HBeAg抑制作用；青天葵组织培养物乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位对HBeAg和HBsAg均具有抑制作用，对HBsAg抑制作用强于对HBeAg抑制作用。 结论：本研究首次采用化学成分预试和紫外光谱线组法对青天葵及其组织培养物进行生药鉴别研究，并以2.2.15细胞为模型，对青天葵及其组织培养物及组织培养物各提取部位进行体外抗乙型肝炎病毒药效学研究，结果表明化学成分预试和紫外光谱线组法特征性强，均可作为青天葵生药鉴别方法；青天葵水提液及其组织培养物水提液、组织培养物乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位均具有抑制2.2.15细胞分泌HBeAg、HBsAg的作用；青天葵组织培养物有望作为青天葵资源加以开发利用。

目录

引 言

第一部分生药鉴别研究

第二部分体外抗乙型肝炎病毒药效学研究

讨 论

结语与展望

参考文献

综 述 青天葵研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文目录

广西中医学院研究生学位论文作者声明

个人简历

附录