高效液相色谱法测定人血浆中奥美拉唑对映体的浓度

摘要

目的：
　　 质子泵抑制剂（proton pump inhibitors，PPIs）是目前显著抑制胃酸分泌、治疗消化性溃疡的一线药物。目前临床常用的PPIs有奥美拉唑（omeprazole）、兰索拉唑（1ansoprazole）、泮托拉唑（palltoprazole）。PPIs都具有手性，存在两个光学异构体，临床上兰索拉唑、泮托拉唑都以消旋体的形式用药。奥美拉唑、兰索拉唑、泮托拉唑对映体药效都存在差异，故建立两个对映体含量测定的分析方法十分有必要。目前拆分PPIs的色谱法有毛细管电泳法、高速逆流色谱法、高效液相色谱法。其中高效液相色谱（HPLC）法应用广泛，用此法拆分PPIs具有快速、简单、可靠、分离效果好、准确度高的优点。
　　 本文旨在考察奥美拉唑对映体、兰索拉唑对映体、泮托拉唑对映体在多糖类手性色谱柱（Chiralpak AD柱、Chiralpak AS柱、Chiralcel OD柱和Chiralcel OJ柱）上的分离行为以及流动相对对映体分离的影响，并建立测定人血浆中奥美拉唑对映体浓度的高效液相色谱分析方法。
　　 方法：
　　 色谱条件色谱柱：Chiralpak AD柱（250 mm×4.6 mm，10μm，Daicel Chemicals）、Chiralcel OJ柱（250mm×4.6mm，10μm，DaicelChemicals）、Chiralpak AS柱（250mm×4.6mm，10μm，DaicelChemicals）、Chiralcel OD柱（250mm×4.6mm，10μm，DaicelChemicals），氰基保护柱（4mm×4mm，10μm，江苏汉邦）。基本流动相：正己烷-异丙醇、正己烷-乙醇、正己烷-异丙醇-甲醇、正己烷-异丙醇-乙醇。紫外检测波长：奥美拉唑302nm，兰索拉唑285mm，泮托拉唑289mm；流速：0.5-1.0mL/mim柱温：25℃；进样量：100μl。
　　 血浆样品含量测定条件：Chiralpak AD柱（250 mm×4.6 mm，10μm，Daicel Chemicals），氰基保护柱（4mm×4mm，10μm，江苏汉邦）；流动相：正己烷一乙醇（30：70，ν/ν）；流速0.5 mL/min：检测波长：302 nm；柱温：25℃；进样量：100μL。
　　 结果：
　　 奥美拉唑对映体、兰索拉唑对映体、泮托拉唑对映体在使用Clliralpk AS柱拆分时效果最好。在使用Chiralpak AD柱拆分奥美拉唑对映体时，流动相分别为异丙醇和乙醇时的洗脱顺序不同。高效液相色谱法测定人血浆中奥美拉唑对映体浓度的方法的相对回收率为（-）-（S）-奥美拉唑96.7％～100.4％，（+）-（R）-奥美拉唑97.4％～100.2％；日内RSD小于4.7％，日间RSD小于3.3％；奥美拉唑对映体在5～1000
　　 ng/mL浓度范围内线性关系良好，（-）-（S）-奥美拉唑（n=5，r=0.9998），（+）-（R）-奥美拉唑（n=5，r=0.9997），最低检测浓度（S/N=3）为2ng/mL。
　　 结论：
　　 本文建立的奥美拉唑、兰索拉唑、泮托拉唑对映体的拆分方法可用于质子泵抑制剂单一对映体的光学纯度测定、质量控制及立体选择性药代动力学研究；建立的人血浆中奥美拉唑对映体浓度的测定方法简单、可靠、灵敏度高、准确度好，可用于人血浆中奥美拉唑对映体人体药代动力学研究。