人血浆中格列吡嗪的检测及动物源食品中莱克多巴胺、氯霉素、玉米赤霉醇类化合物残留检测

摘要

本文分为两个部分，第一部分建立了人血浆中格列吡嗪的液相色谱-串联质谱检测方法，第二部分建立了动物源食品中莱克多巴胺、氯霉素和玉米赤霉醇类化合物残留量检测方法。
　　第一部分人血浆中格列吡嗪的测定
　　目的：本研究拟建立一种准确、灵敏的高效液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法测定格列吡嗪血药浓度，并对其进行方法学各项指标考察。
　　方法：采用API3000型LC-MS/MS液质联用系统，Phenomenex C18分析柱(50 mm×3.0 mm，5μm)，流动相为甲醇:水:甲酸（62:38:0.025），流速为0.2 mL/min，样品在酸性条件下用二氯甲烷提取富集后进样，采用电喷雾离子源（ESI），正离子MRM模式测定，卡马西平作为内标。格列吡嗪和卡马西平的检测离子对分别为m/z446.4→m/z321.1和m/z237.2→m/z194.1。
　　结果：检测格列吡嗪在1～1000μg/L浓度范围内线性关系良好，最低定量限为1μg/L，批内和批间精密度良好，RSD分别小于4.47％和6.00%，方法回收率在89.86%～94.50%。
　　结论：本研究建立的LC-MS/MS测定格列吡嗪的方法具有快速简便、灵敏、准确等特点，适用于血浆中格列吡嗪含量测定及临床药代动力学研究。
　　第二部分动物源食品中莱克多巴胺、氯霉素、玉米赤霉醇类化合物残留检测
　　目的：本文建立了动物源食品中莱克多巴胺、氯霉素和6种玉米赤霉醇类化合物（玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮）残留量的免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱（IAC-LC-MS/MS）分析方法。
　　方法：样品酶解后，经乙酸乙酯-乙醚提取，提取液旋干后用5 mL甲醇溶解残渣，氮气吹干，残留物用2 mL50%乙腈溶液溶解、过滤，取1 mL续滤液用PBS溶液稀释至10 mL，经复合免疫亲和柱富集净化后用3 mL无水乙醇洗脱后，供LC-MS/MS分析。色谱柱：Shimadzu Shim-pack VP-ODS（150 mm×2.0 mm，5μm）。流动相：乙腈（A），2 m mol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）（B）。RAP梯度洗脱程序：0~5.0 min，5%A；5.0~11.0 min，5%～60%A；11.0~11.5 min，60~95%A；11.5~13.0 min，95%～5%A；流速：0.30 mL/min，柱温：40℃，进样量：20μL。质谱条件：电喷雾正离子-多反应监测检测（ESI+-MRM）；电喷雾电压：5.5kV；雾化气压力：0.31 MPa；气帘气压力：0.28 MPa；辅助气压力：0.41 MPa；离子源温度：650℃。CAP和ZER的梯度洗脱程序：0~4.0 min，25~75%A；4.0~7.0 min，75%A；7.0~7.5 min，75~25%A；7.5~8.0 min，25%A；流速：0.30 mL/min，柱温：40℃，进样量：10μL。质谱条件：电喷雾负离子-多反应监测检测（ESI--MRM）；电喷雾电压：-4.5kV；雾化气压力：0.24 MPa；气帘气压力：0.28 MPa；辅助气压力：0.41 MPa；离子源温度：550℃。
　　结果：8种目标分析物的标准曲线r2≥0.9994，RAP、CAP和ZER检出限在0.007~0.04μg/kg之间，定量限在0.02~0.1μg/kg之间，平均回收率为75.6~101.0%，相对标准偏差在1.5~9.1%之间，基质效应（SSE）为88.5~113.8%。
　　结论：该方法准确度好、灵敏度高，重现性好，能够实现动物源食品中痕量莱克多巴胺、氯霉素和玉米赤霉醇残留的检测。

目录

英汉缩略语名词对照

前言

第一部分LC-MS/MS法测定人血浆中格列吡嗪的浓度

1仪器与材料

2 实验方法

3 实验结果

4 讨论

5 结论

第二部分 复合免疫亲和柱净化-LC-MS/MS法测定动物源食品中莱克多巴胺、氯霉素、玉米赤霉醇类化合物残留量

1 仪器与材料

2 实验方法

3实验结果

4 讨论

5 结论

全文总结

参考文献

文献综述:动物源性食品中β-受体激动剂残留检测前处理及其分析方法研究进展

致谢

攻读硕士研究生学位期间发表的论文