广州及周边地区蝙蝠携带SARS（样）冠状病毒、狂犬病毒和禽流感病毒的初步流行病学调查

摘要

研究背景：近年来发现蝙蝠是多种人兽共患疾病病毒的储存宿主，蝙蝠可以持续感染许多病毒而不表现临床症状。SARS首先在广东爆发，尽管先前对这种新病毒的致病性和分子特征的研究取得了成功，但仍没有找到SARS冠状病毒的来源。流行病学调查及果子狸体内检测到SARS样病毒，表明SARS冠状病毒(serveacuterespiratorysyndrome-associatedcoronavirus，SARS-CoV)可能来自野生动物，但随后的调查发现感染在野生或人工饲养的果子狸并不常见，而且果子狸在感染两种不同的SARS-CoV人分离株后，表现出明显的临床症状，提示果子狸可能不是SARS-CoV的自然宿主。果子狸可能只是SARS-CoV的中问宿主，SARS-CoV有可能是从别的野生动物(如在野生动物市场的野生动物)传播给果子狸。广东地区有食用果蝠的现象，野生动物市场每天汇集来自广州及周边地区的捕捉的果蝠，然后再分销至广州及周边城市的酒店和茶楼。这样就造成或增加了野生动物之间和野生动物与人接触的机会，也就增加了一些疾病在野生动物之间及在野生动物与人之间传播的可能，使得某些疾病跨物种传播成为可能。若果蝠携带SARS冠状病毒就有可能将SARS冠状病毒传染给人或其它动物(比如果子狸)，果蝠有可能是SARS-CoV和SARS样冠状病毒(SARS-like-CoV)冠状病毒的自然保菌宿主之一。研究发现蝙蝠与狂犬、乙脑等发病有一定的关系。禽流感病毒主要自然储存宿主是禽类，但是否还存在其他野生动物自然宿主，如果蝠，还有待于进一步调查研究。是果蝠可能携带的病毒以及与人类疾病、健康之间的关系和流行病学调查研究几乎空白。因此有必要对广州及周边地区的蝙蝠种类、分布、数量、生态习性等开展调查，对果蝠及其它蝙蝠可能携带SARS(样)冠状病毒(SARS(-like)-CoV)、狂犬病毒(Rabiesvirus，RV)与禽流感病毒(Avianinfluenzavirus，AIV)的情况开展流行病学调查。 研究目的：1.对广州市及周边地区的蝙蝠种类、分布、生态习性等开展初步调查，为进一步深入开展该地区蝙蝠可能携带的重要传染病病毒及与当地人群之间的健康、疾病之间的关系的流行病学调查奠定基础。 2.对广州及周边地区和广州野生动物市场的蝙蝠携带SARS(样)冠状病毒的情况开展流行病学调查，为进一步阐明SARS源头及传播链提供线索。 3.对广州及周边地区和广州野生动物市场的蝙蝠携带狂犬病毒和禽流感病毒的情况开展流行病学调查，为狂犬病和禽流感疾病的预防提供更全面的理论依据。 研究方法：1.调查，走访、请教国内研究蝙蝠的专家教授，获取广州及周边地区蝙蝠的种类、分布、生态习性等资料。 2.在调查地区开展现场调查，了解是否有蝙蝠存在、蝙蝠的种类及与当地人群疾病、健康等可能存在的关系。 3.对广州的野生动物市场开展调查，了解野生动物市场私自销售的蝙蝠种类、数量、来源及分销地点。 4.捕捉蝙蝠，采集标本，并请研究蝙蝠的动物学专家对蝙蝠种类进行鉴定，对蝙蝠可能携带的SARS(样)冠状病毒、狂犬病毒和禽流感病毒采用细胞培养、RT-PCR、荧光PCR、基因芯片等多种方法进行病源学检测，检测过程严格质量控制。 质量控制：1.本次调查强化全程质量控制措施，标本与阳性对照采用统一的检测方法。 2.标本取材新鲜，采用病毒保存液制备病毒悬液，减少病毒可能的损失。提取的RNA经检测表明纯度较高，完整性好，含量较高。 3.分子生物学检测采用多对引物同时检测，降低了不同引物扩增效率不同的影响。除了阳性对照、阴性对照和空白对照，还设立了模拟对照，以排除标本和病毒保存液可能对RNA的提取、RT-PCR检测的干扰。优化检测反应条件。 4.上述实验对照全部成立，试验条件稳定重复性好，说明检测方法可靠。 5.为减少系统误差，减少检测的假阴性，对部分标本还采用并联检测法和重复一次检测。 通过上述严格的实验质量控制，优化检测条件，可以提高本次检测的灵敏度，减少假阴性，检测结果可信。 研究结果：1.本次调查发现广州市有4科9属15种蝙蝠。主要有：狐蝠科(Pteropodidae)：棕果蝠(Rousettusleschenaulti)，犬蝠(Cynpterussphinx)，短耳犬蝠(Cynopterusbrachotis)。菊头蝠科(Rhinolophidae)：中菊头蝠(Rhinolophusafffinis)，中华菊头蝠(Rhinolophussinicus)，小菊头蝠(Rhinolophusblythi)。蹄蝠科(Hipposideridae)：小蹄蝠Hipposiderospomona。蝙蝠科(Vespertilionidae)：中华山蝠(Nyctalusvelutinus)，灰伏翼(Pipistrelluspulveratus)，小伏翼(Pipistrellustenuis)，东亚伏翼(Pipistrellusabramus)，扁颅蝠(Tylonycterispachypus)，小黄蝠(Scotophiluskuhli)，大黄蝠(Scotophilusheathi)，彩蝠(Kerivoulapicta)。 2.广州及周边地区生活有可能携带虫媒病毒的多种蝙蝠，因此这些蝙蝠有可能携带罗斯河病毒、乙脑病毒、森林脑炎病毒、基孔肯亚病毒、登革病毒、狂犬病毒、SARS(样)冠状病毒和西尼罗河病毒等虫媒病毒。 3.从2004年9月至2005年11月，本次调查从共收集分别属于两个亚目9个种的905只蝙蝠：犬蝠(Cynopterussphinx)395只、棕果蝠(Rousettusleschenault)154只、普通长翼蝠(Miniopterusschreibersi)5只、普氏蹄蝠(Hipposiderospratti)7只、中华菊头蝠(Rhinolophussinicus)15只、小黄蝠(Scotophiluskuhlii)52只、大耳双色蹄蝠(HipposiderosPomona)8只、中菊头蝠(Rhinolophusaffinis)228只及小菊头蝠(Rhinolophuspusillus)41只。 4.上述9个种905只蝙蝠的共计3043份标本(咽拭813，血清524，肺组织853，直肠粪便853)用新型冠状病毒(N-蛋白)测定试剂盒(酶联免疫法)、SARS-CoVRNA检测试剂盒、荧光PCR、基因芯片检测、RT-PCR和Vero-E6细胞分离培养等检测SARS(样)冠状病毒，结果未检测、分离到SARS(样)冠状病毒。 5.其中7个种的蝙蝠794只(犬蝠(Cynopterussphinx)330只、普氏蹄蝠(Hipposiderospratti)7只、棕果蝠(Rousettusleschenault)154只、普通长翼蝠(Miniopterusschreibersi)5只、小黄蝠(Scotophiluskuhlii)52只、中菊头蝠(Rhinolophusaffinis)209只及小菊头蝠(Rhinolophuspusillus)37只)取得3391份标本(咽拭719，血清452，脑组织742，肺组织742，直肠组织742)，采用RT-PCR和Vero-E6细胞分离培养等检测狂犬病毒与禽流感病毒。结果未检测、分离到狂犬病毒和禽流感病毒。 结论：1.本次调查发现广州市有4科9属15种蝙蝠主要有：狐蝠科(Pteropodidae)：棕果蝠(Rousettusleschenaulti)，犬蝠(Cynpterussphinx)，短耳犬蝠(Cynopterusbrachotis)。菊头蝠科(Rhinolophidae)：中菊头蝠(Rhinolophusaffinis)，中华菊头蝠(Rhinolophussinicus)，小菊头蝠(Rhinolophusblythi)。蹄蝠科(Hipposideridae)：小蹄蝠Hipposiderospomona。蝙蝠科(Vespertilionidae)：中华山蝠(Nyctalusvelutinus)，灰伏翼(Pipistrelluspulveratus)，小伏翼(Pipistrellustenuis)，东亚伏翼(Pipstrellusabramus)，扁颅蝠(Tylonycterispachypus)，小黄蝠(Scotophiluskuhli)，大黄蝠(Scotophilusheathi)，彩蝠(Kerivoulapicta)。这些蝙蝠有可能携带罗斯河病毒、乙脑病毒、森林脑炎病毒、基孔肯亚病毒、登革病毒、RV、SARS-CoV、SARS(-like)-CoV和西尼罗河病毒等虫媒病毒。 2.从2004年9月至2005年11月，本次调查的广州及周边地区的9个种的905只蝙蝠未检测和分离到SARS(样)冠状病毒、狂犬病毒及禽流感病毒。 3.调查未发现检测的病毒这可能与检测的蝙蝠的种类、每种蝙蝠的数量、蝙蝠携带的病毒量及调查的地区、时间有关。

目录

文摘

英文文摘

前 言

第一章广州及广州周边地区蝙蝠种类、分布、生态习性等初步调查

第二章广州及周边地区蝙蝠携带SARS(样)冠状病毒的初步流行病学调查

第三章广州及周边地区蝙蝠携带禽流感、狂犬病毒的初步流行病学调查

果蝠与人类(新现)病毒性疾病

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