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中华麒麟桑桑叶蛋白的分离提取与酶促水解

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第一章文献综述

第二章桑叶蛋白的分离提取

第三章桑叶蛋白酶促水解的高效酶的筛选

第四章高F值低聚肽的制备

第五章结论

参考文献

致谢

个人简介

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摘要

植物叶蛋白来源广泛,是世界上最丰富的蛋白资源之一。目前有关研究主要集中在畜牧方面,而其特有的青草味,难溶性使之在食品方面应用较少。本文以桑叶为原料,分离提取其中的叶蛋白,并利用其自身的特性,加以酶解,克服与改善叶蛋白在食品加工上的部分不利因素,并进行高F值低聚肽制备。 桑叶蛋白溶出率试验中,最佳条件为料液比1∶20,打浆时间20min,pH值为9.0,叶蛋白最大溶出率为6.57%。而叶蛋白提取方法中,酸沉法效果优于加热法、酸热法以及盐析法,其最适pH值为3.0,提取率为26.73%,经真空冷冻干燥成粉粗蛋白含量为34.15%,加热与酸沉结合不能提高提取率。盐析法最适(NH4)2SO4饱和度为50%,最大提取率30.43%。 叶蛋白干燥宜选用冷冻干燥法,蛋白品质高,气味芳香,易于使用。 试验对三种蛋白酶水解叶蛋白的工艺进行了优化:Alcalase最适水解条件为底物浓度2%,酶浓度50u/ml,pH值7.0,温度55℃,叶蛋白的水解度为11.537%;Flavourzyme分别对应1%、25u/ml、6.5、40℃,叶蛋白的水解度为11.019%;Papain为2%、100u/ml、6.0、35℃,叶蛋白的水解度为8.685%。蛋白酶能够彻底水解叶蛋白的部分组分,降低叶蛋白多肽的分子量。 三种酶解产物都有浓郁的茶香味,无苦味。Papain水解物的蛋白回收率最高,达90.77%,但Flavourzyme水解液色泽清亮。 使用盐析蛋白进行高F值低聚肽制备,Alcalase和Papain双酶水解液后溶液的水解度达到12.57%。活性炭脱芳优化试验可使得OD220保留12.63%,OD260脱除将近100%,经测试,F值高达174.528,平均肽链长度为3.16。活性炭脱芳后的水解液为透明清亮的液体,无气味。

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