饲料中添加精油与有机酸混合物对凡纳滨对虾生长和免疫的影响

摘要

为探讨饲料中添加精油与有机酸复合包被物(AviPlus(R)AP)对凡纳滨对虾生长和非特异性免疫力的影响，本研究设计了两个试验。
　　1.不同水平梯度的AP对凡纳滨对虾生长、肠道健康和抗副溶血弧菌感染力的影响
　　本试验选取525尾均重为0.2g的试验虾苗进行为期8周的养殖试验。在基础组饲料上分别添加0、0.3、0.6、0.9和1.2g/kg AP，形成Con组、AP0.3组、AP0.6组、AP0.9组和AP1.2组。每组设置3个平行，每个平行35尾虾。结果:各组凡纳滨对虾的存活率差异不显著（P＞0.05），且各组平均存活率均在94.29％以上。除AP0.3组外，其他添加组的血清总蛋白含量均显著高于Con组（P＜0.05）。AP0.9和AP1.2组的血清碱性磷酸酶和酚氧化酶活性均显著高于Con组(P＜0.05）。AP0.6组血清谷胱甘肽过氧化氢酶活性达到最大值，并且显著高于Con组(P＜0.05）。AP添加组的促炎因子(TNF-α、LITAF和Rab6a)的表达量均下调。AP0.6和AP1.2组肠道菌群OTUs值均高于Con组。AP0.9和AP1.2组中的厚壁菌门丰富度高于Con组，而变形菌门丰富度趋势相反，AP1.2组中的乳酸杆菌数量显著高于Con组(P＞0.05）。副溶血弧菌感染48h后，AP0.3组凡纳滨对虾的存活率显著高于Con组，AP添加组的免疫相关因子（溶菌酶、对虾素和过氧化氢酶）表达量均显上调（P＜0.05）。表明，添加AP有益于肠道健康和提升凡纳滨对虾的免疫力。
　　2.低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾生长、消化率以及肝胰腺和肠道健康的影响
　　本试验以含有25％鱼粉的饲料作为对照组(HFM)，用豆粕分别替代对照组饲料20％和40％的鱼粉形成饲料SM1和SM2，分别向SM1和SM2组饲料中添加0.6g/kg添加剂AP，形成饲料ASM1和ASM2组，共计5种试验饲料，进行为期8周的摄食生长试验。每组设置4个平行，每个平行50尾虾(初始重:0.56±0.01g)。结果:各组凡纳滨对虾的成活率无显著差异(P＞0.05），且均在88％以上。HFM和ASM1组凡纳滨对虾的增重率均显著高于SMA、SM2和ASM2组(P＜0.05）。与HFM组相比，SM1和ASM1组的饲料系数无显著变化(P＞0.05），而SM2和ASM2组的饲料系数均显著上升(P＜0.05）。与SM1组相比，ASM1组饲料的粗蛋白表观消化率显著升高(P＜0.05）。与HFM组相比，ASM1组血清总蛋白和谷草转氨酶含量显著升高(P＜0.05）;血清中白蛋白、葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶和丙二醛含量均无显著变化(P＞0.05);SM1和ASM1组血清酚氧化酶活性显著升高(P＜0.05），而SM2和ASM2组的血清酚氧化酶活性无显著变化(P＞0.05);SM1组血清谷胱甘肽过氧化氢酶活性无显著变化（P＞0.05），而ASM1组血清谷胱甘肽过氧化氢酶活性显著升高(P＜0.05);ASM1和ASM2组血清总抗氧化能力无显著变化（P＞0.05），而SM1和SM2组血清总抗氧化能力显著下降（P＜0.05）。肝胰腺切片观察显示，随着替代水平增加，肝胰腺中B细胞逐渐变小，ASM1和ASM2组肝小体中R细胞数量高于其他组，SM2组中肝小体基底膜破损较为严重。各组肝胰腺中过氧化氢酶、Pen-3a和碱性磷酸酶的基因表达量均无显著差异（P＞0.05）。与HFM组相比，ASM1组肝胰腺中溶菌酶和C型凝集素3的基因表达量无显著变化(P＞0.05），而SM2和ASM2组显著下调（P＜0.05）。HFM和ASM1组肠道中厚壁菌门的丰富度均高于其他组。ASM1和ASM2组肠道中假交替单胞菌的数量均低于SM1和SM2组。与HFM组相比，ASM1和ASM2组肠道中TNF-α的基因表达量无显著变化（P＞0.05），而SM1和SM2组上调;SM1和SM2组肠道中Rab6a的基因表达量均无显著变化(P＞0.05），而ASM1和ASM2组均显著下调(P＜0.05);ASM1组肠道中溶菌酶的基因表达量无显著变化（P＞0.05），而SM1、SM2和ASM2组均显著下调（P＜0.05）。各组肠道中超氧化物歧化酶的基因表达量无显著变化（P＞0.05）。SM2组肠道中一氧化氮合酶的基因表达量显著高于其他组(P＜0.05）。表明:高豆粕饲料会降低南美白虾的生长、消化和非特异性免疫力。饲料中添加0.6g/kg AP可以提高凡纳滨对虾的生长和免疫力，改善肠道菌群环境，解肠道炎性，降低肝胰腺组织损伤缓。

目录

声明

摘要

1．1 文献综述

1．1．1 有机酸的来源及理化性质

1．1．2 有机酸的生物学功能

1．1．3 精油的来源及理化性质

1．1．4 精油的生物学功能

1．1．5 精油和有机酸在水产养殖中的研究进展

1．2 研究的目的及意义

1．3 研究内容

1．4 技术路线

第2章 饲料中添加AP对凡纳滨对虾生长和血清指标的影响

2．1 材料与方法

2．1．1 试验饲料配方及制作

2．1．2 试验对虾与养殖管理

2．1．3 样品采集及处理

2．1．4 指标测定方法

2．1．5 计算公式

2．1．6 数据统计

2．2 结果

2．2．1 饲料中添加AP对凡纳滨对虾生长性能的影响

2．2．2 饲料中添加AP对凡纳滨对虾血清免疫指标的影响

2．3 讨论

2．3．1 饲料中添加AP对凡纳滨对虾生长性能的影响

2．3．2 饲料中添加AP对凡纳滨对虾血清免疫指标的影响

2．4 小结

第3章 饲料中添加AP对凡纳滨对虾肠道菌群和相关炎性因子基因表达量的影响

3．1 材料与方法

3．1．1 试验饲料配置及制作

3．1．2 试验对虾与饲养管理

3．1．3 样品的采集及处理

3．1．4 指标测定与方法

3．1．5 数据分析

3．2 结果

3．2．1 饲料中添加AP对凡纳滨对虾肠道菌群的影响

3．2．2 饲料中添加AP对凡纳滨对虾肠道炎性因子表达量的影响

3．3 讨论

3．3．1 饲料中添加AP对凡纳滨对虾肠道菌群的影响

3．3．2 饲料中添加AP对凡纳滨对虾肠道炎性因子表达量的影响

3．4 小结

第4章 饲料中添加AP对凡纳滨对虾抗副溶血弧菌感染能力的影响

4．1 试验材料与方法

4．1．1 试验配方及制作

4．1．2 试验对虾及饲养管理

4．1．3 菌种培养及攻毒方式

4．1．4 样品的采集与处理

4．1．5 指标的测定及方法

4．1．6 数据分析

4．2 结果

4．2．1 饲料中添加AP对凡纳滨对虾成活率的影响

4．2．2 饲料中添加AP对攻毒48 h后的凡纳滨对虾肝胰腺免疫相关基因表达量的影响

4．3 讨论

4．2．1 饲料中添加AP对凡纳滨对虾成活率的影响

4．2．2 饲料中添加AP对副溶血弧菌感染48 h后凡纳滨对虾肝胰腺相关细胞因子基因表达量的影响

4．4 小结

第5章 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾生长性能和血清指标的影响

5．1 材料与方法

5．1．1 试验饲料配方及制作

5．1．2 试验对虾与养殖管理

5．1．3 样品采集及处理

5．1．4 指标测定方法

5．1．5 计算公式

5．1．6 数据统计

5．2 结果

5．2．1 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾生长性能的影响

5．2．2 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾表观消化率的影响

5．2．3 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾血清生化指标的影响

5．2．4 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾血清免疫和抗氧化指标的影响

5．3 讨论

5．3．1 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾生长性能的影响

5．3．2 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾表观消化率的影响

5．3．3 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾血清生化指标的影响

5．3．4 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾血清抗氧化和免疫指标的影响

5．4 小结

第6章 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾肝胰腺组织形态和肝胰腺相关细胞因子表达量的影响

6．1 试验材料与方法

6．1．1 试验配方及制作

6．1．2 试验对虾及饲养管理

6．1．5 指标的测定及方法

6．1．6 数据分析

6．2．1 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾肝胰腺组织形态的影响

6．2．2 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾肝胰腺相关细胞因子表达量的影响

6．3 讨论

6．3．1 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾肝胰腺组织形态的影响

6．3．2 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾肝胰腺免疫因子表达的影响

6．4 小结

第7章 饲料中添加AP对凡纳滨对虾肠道菌群和肠道相关细胞因子表达的影响

7．1 试验材料与方法

7．1．1 试验配方及制作

7．1．2 试验对虾及饲养管理

7．1．3 样品的采集与处理

7．1．4 指标的测定及方法

7．1．5 数据分析

7．2 结果

7．2．1 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾肠道菌群的影响

7．2．2 低鱼粉饲料中加AP对凡纳滨对虾肠道相关细胞因子表达量的影响

7．3 讨论

7．3．1 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾肠道菌群的影响

7．3．2 低鱼粉饲料中添加AP对凡纳滨对虾肠道相关细胞因子表达的影响

7．4 小结

全文总结

致谢

参考文献

在学期间科研成果情况