ペプチドタグ間のライゲーションとNanoLuc レポーターを用いた合成化合物-タンパク質相互作用の細胞内検出

摘要

薬剤などの合成化合物と細胞内タンパク質との相互作用について、実際に働く場である細胞内で評価することは重要である。本研究室では、そのような合成化合物とタンパク質間との相互作用を調べる方法として、反応性ペプチドタグを用いた相互作用検出法の開発を行っている。本検出法では、相互作用に依存してペプチドタグ間がネイティブケミカルライゲーション（NCL）によって連結し、この生成したペプチド鎖と酵素断片を再構成させることで、合成化合物とタンパク質間の相互作用を酵素活性を指標として検出できる。本発表では、発光特性に優れたNanoLuc ルシフェラーゼをレポーターとした系を用い、細胞内での合成化合物-タンパク質間の相互作用検出について検討した。