基于牛分支杆菌Rv3872/CFP-10/ESA-T-6融合蛋白的免疫传感器研究

摘要

目的：利用牛分支杆菌rv3872，cfp-10、esat-6融合蛋白(REC)制备免疫传感器，以期用于牛分支杆菌感染的检测。方法：通过纳米金颗粒对生物分子的吸附作用，将原核表达纯化的融合蛋白(RCE)固定在由nano-Au／Thi／Nafion-MWCNT修饰的玻碳电极(GCE)上，以循环伏安法(CV)作为免疫电极表征和定性判定的方法，测定免疫反应前后还原峰电流下降的比例(k)，以实现对血清样本中抗体的检测。结论：初步建立了该融合蛋白免疫传感器对牛分支杆菌感染阴阳性判定标准，k>15.8％判为阳性，K<15.8％判为阴性。该传感器在灵敏性(RCE抗体在20480倍稀释时，Elisa检测不出阳性，而免疫传感器能检测出阳性)、特异性(RCE抗体引起的K值(47.1％)远大于其他几种杆菌引起的k值)、重复性(批内变异系数为1.51％，批间变异系数为2.97％)、准确性(与ELISA试剂盒检测结果相符率为100％)方面都表现出良好的效果，有望用于牛分支杆菌感染的快速检测。