安徽乌菜SRAP技术体系优化

摘要

以合肥黄心乌为试材,利用正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中的Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度和模板DNA浓度进行5因素4水平的筛选分析,用me3-em3引物组合进行PCR扩增以确定最佳反应体系.结果表明,安徽乌菜SRAP-PCR最佳反应体系为:10×PCR buffcr.2μl,Mg2+ 3.0mmol/L,dNTPs 0.2mmol/L,引物0.5μmol/L,模板DNA 40ng,Taq聚合酶0.5U,总体积为10μl.利用此反应体系对安徽乌菜进行PCR扩增并电泳检测,其结果清晰、稳定、可靠,可用于安徽乌菜的遗传分析。