粘球菌应答调控蛋白DidR作用机制的初步研究

摘要

粘球菌以复杂的子实体发育行为而著称，粘球菌的这一复杂的子实体发育行为与双组份系统紧密相关。孤儿双组份系统应答调控蛋白DidR，N端含有DNA结合结构域，C端含有信号接收结构域，该蛋白在粘球菌的子实体发育过程中发挥重要作用。DidR蛋白缺失后，菌株△MXAN1093表现出特殊的发育性状:饥饿条件下菌体早期能够聚集成不典型的子实体，但无法生成抗逆性孢子。△MXAN1093与DK1622的共发育表明didR缺失菌株的发育缺陷与胞外信号无关。与敲除菌株△MXAN1093不同的是，磷酸化定点突变菌株D128N的S运动降低，胞外多糖EPS产量降低，发育早期聚集缓慢，无法生成抗逆性孢子。磷酸化定点突变菌株D128N能够模拟蛋白非磷酸化形式的功能，D128N与△MXAN1093的差异表明DidR的磷酸化形式和非磷酸化形式在子实体发育过程中均发挥重要作用。D128N的EPS产量降低为野生菌株的52%，这表明DidR的非磷酸化形式具有抑制EPS的功能。D128N在发育早期的聚集迟缓，而△MXAN1093早期聚集正常，D128N和△MXAN1093的生孢能力均降低，这表明DidR在发育早期的聚集过程和发育后期的生抱过程均发挥与重要作用。