BDNF基因转染促进骨髓间充质干细胞分化神经元样细胞

摘要

目的：利用基因转染技术,将脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)基因转入骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),使其在作为种子细胞的同时,作为基因治疗的载体将BDNF基因导入脊髓损伤组织,从而为探索一种更为有效的脊髓损伤治疗方法提供实验基础.方法：1分离、培养、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞；2试验组应用已构建的pEGFP-N1-BDNF进行基因转染,阳性对照组用pEGFP-N1空质粒进行转染,阴性对照组只加入培养基,并进行Western blotting分析；3将转染BDNF的试验组和未转染的阴性对照组细胞在体外向神经元样细胞进行诱导分化,比较两组细胞诱导后神经元样细胞分化率,并进行统计学分析.结果：1流式细胞检测所培养细胞CD90、44(+),CD34、45(-)；2经Western blotting检测证实试验组MSC表达BDNF-EGFP;3试验组细胞向神经元样细胞分化率高于未转染的阴性对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论：BDNF在MSc向神经元样细胞分化过程中具有重要作用,BDNF基因转染MSC后,可以促进其向神经元样细胞分化,从而将BDNF修饰和干细胞移植在脊髓损伤治疗中有效的结合起来.