益气除痰方对缺氧人脐静脉内皮细胞迁移和侵袭能力的影响

摘要

目的：研究益气除痰方(YQCTF)对缺氧人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移和侵袭能力的影响及机制探讨. 方法：采用氯化钴(CoCl2)化学诱导建立细胞缺氧模型,加入不同浓度YQCTF干预,设立HUVEC常氧(Norm)组、缺氧造模(Hyp)组、缺氧+YQCTF低浓度(L)组、缺氧+YQCTF中浓度(M)组、缺氧+YQCTF高浓度(H)组,采用噻唑蓝比色(MTT)法和流式细胞术检测细胞活力和细胞周期;细胞划痕实验和transwell小室溅定细胞修复迁移和侵袭能力;Western blot和QPCR实验检测缺氧诱导因子1(HIF-1α)、葡萄糖调节蛋78(GRP78)、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶1/2(MAPK/ERK1/2)、粘着斑激酶(FAK)、p-ERK、p-FAK蛋白和基因HIF-1α、GRP78、ERK1、ERK2、FAK、mRNA水平表达. 结果：与Norm组比较,Hyp组HUVEC无明显细胞增殖,但细胞修复距离和侵袭能力增强,且HIF-1α、GRP78、MAPK/ERK、FAK蛋白表达和基因mRNA表达升高,ERK、FAK磷酸化水平增强;与Hyp组组比较,YQCTF可明显抑制缺氧下HUVEC增殖,抑制细胞有丝分裂,降低细胞修复和细胞侵袭能力形成能力,呈现剂量依赖性,并可下调HIF-1α、GRP78、MAPK/ERK、FAK蛋白表达和基因mRNA水平,降低ERK、FAK磷酸化水平. 结论：益气除痰方可抑制缺氧诱导的HUVEC细胞迁移和侵袭,可能与其调控HIF-1α、GRP78、MAPK/ERK、FAK的蛋白表达和基因mRNA水平有关.